第4章节第五节血液细胞染色体检验.pptVIP

骨髓细胞染色体检验 临床血液检验教研室 邵泽伟 副教授 基础知识简介 1960年Nowell和Hungerford发现了慢性粒细胞白血病特异性染色体异常，即Ph染色体，从此推动了细胞遗传学在肿瘤细胞学上的广泛应用，促进了血液肿瘤分子生物学的发展。 血细胞染色体检验技术 主要包括染色体非显带技术、染色体显带技术、染色体高分辨技术、姐妹染色单体互换技术、染色体脆性部位显示技术和早熟凝集染色体技术等。 80年代又发展了染色体原位杂交技术(FISH)，这一技术将分子探针与染色体杂交，拓展了检测范围，提高了检测的灵敏度。 自动化染色体分析技术提供了菜单式操作，简单易行，在资料存储、染色体图像处理和核型分析方面显示了独特优势。 一、染色体非显带技术 (一)原理 染色体制备的关键是获得足够的分裂中期细胞。如骨髓可直接得到分裂中期细胞，而外周血淋巴细胞需经体外培养，植物凝集素（PHA）刺激细胞分裂以获得分裂中期细胞。骨髓细胞常规染色体制备方法包括直接法和培养法两种。 直接法 1．直接法： 抗凝骨髓标本不经培养，以PBS稀释后加人秋水仙素“阻留”中期细胞，经低渗液处理后，再经预固定、固定后即可染色作镜检