聲光驅動高速4D活體成像及光刺激系統.doc

声光驱动高速 4D活体成像及光刺激系统 用途：在超大镜下操作空间，非人灵长类动物，行为、功能和结构神经生理学，深度组织 1.飞秒激光器系统 1.1 一体化全自动飞秒级红外脉冲激光器Mai Tai DeepSeeTM及激光耦合系统： 1.1.1 脉冲宽度0fs，波长范围6nm -1300nm，平均输出功率W@900nm； 1.1.2 配备负色散补偿光学系统，补偿飞秒级脉冲光子经过光路后的脉宽展宽物理，自带色散补偿：800 nm: 0fs2 to -25,000fs2 ；1050 nm: 0fs2 to -10,000fs2； 1.2 MaiTai HP 一体化全自动飞秒级红外超快脉冲激光器脉冲宽度100fs，波长范围6nm -1040nm，平均输出功率2.5W，激光峰值≥300kW； 2.声光驱动高速双光子4D活体成像及光刺激系统 深度组织 2.2双光子光路检测范围 390-1300nm，镀银高透过率光学振镜，扫描速率可达30-50 kHz 2.3 双光子主成像系统不能使用扫描振镜，需使用技术Acousto-optic 的实时双光子显微镜 2.3.1 四个大孔径宽带AO偏转器AO可控偏转波长725 nm-975 nmZ 轴聚焦AO光学部件和XY水平扫描AO光学部件分立式设计，增加水平扫描视野范围 2.3.2 2D AO扫描单元负责做xy扫描，前一对AO偏转器负责漂移补偿，第二对AO偏转器负责Z方向聚焦像散和光学误差补偿单元用于改善空间分辨率； 2.3.3追踪沿着神经元细胞的信号传播和累积过程，纪录 个神经元细胞的协同活动 2.4 系统采用随机接入式扫描模式，其空间4D可测量成像速度比现有商品化技术提高（102～106），具备极高但信号收集效率 2.5 使用声光驱动该项技术，系统可以在54.7 μs 时间分辨率内区分AP诱导的4D钙反应，这使得在小树突片段水平上测量快速的再生活性（ast regenerative activity）成为可能； 2.6 点扩散函数（PSF）可以在空间任意纬度上以50-100 nm 精度进行调节。因此，Z平面和各轴向的取样数都没有限制，这样可以非常精确的控制； 2.7在290 μm × 290 μm × 200 μm的3D空间维度内，水平和轴向的点扩散函数可以分别维持在0.8 μm 和 3 μm以下，因此可以测量单个树突棘； 2.8可以在1立方毫米体积内测量单个动作电势（action potential–induced transients）； 2.9 在不进行任何机器移动的情况下，驱动激发光焦点在镜头视野内，毫米级深度范围内驱动激发焦点进行3D任意点定位成像，每循环频率20/N kHz ～ 50/N kHz（N＝取样点数 2.10 20X镜下最高扫描频率： 2.10.1 每点取样时间： 0.5 μs – 10 ms 2.10.2 700 μm x 700 μm x 1400 μm ≥50kHz (透明样品) 2.10.3 550 μm x 550 μm x 650 μm ≥50kHz （在体样品） 2.10.4 650 μm x 650 μm x 650 μm ≥50kHz（离体组织器官样品） 2.11采用4D随机接入式扫描模式4D 多轨迹扫描，4D任意帧扫描可以在μs时间分辨率内区分AP诱导的4D钙反应，这使得在小树突片段水平上测量快速的再生活性成为可能 2.12第二套扫描（Optogenetic stimulation）系统 2.12.1 使用galvano双扫描镜，自动起点校准数字驱动器，实时定位检测和控制自动化的随意扫描模式优化解笼锁/光遗传等操作 2.12.2基于红外超快脉冲激光的光遗传刺激系统（Optogenetic stimulation），更加自动化的随意线扫描模式，优化解笼锁／光遗传等操作，可以执行mapping扫描模式； 2.13小鼠头戴式微型 2.13.1 重量?2.5g；尺寸：13.2 mm x 13.2 mm x 17 mm； 2.13.2 荧光显微成像，光波长：488nm 2.13.3成像分辨率：720 pixels x 576 pixels； 800 μm x 800 μm?；成像速度：25/s。 2.13.5 数据采集输出系统 2.14 在3D空间维度内水平分辨率0.8μm ，垂直分辨率3μm，可以测量单个树突棘。 2.15点扩散函数（PSF）可以在空间任意纬度上以50-100 nm 精度进行调节。 2.16 3个反射双光子荧光NDD检测器，一个为GaAsP PMT, 两个为多碱PMT检测器。配备BFP/GFP/DsRed和CFP/YFP/DsRed等基本成像组合滤镜，和升级用空滤色镜组块。 2.17 2个透射双光子荧光NDD检