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第21章节免疫学方法的技术
第21章 免疫学方法技术
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第一节基于Ag-Ab反应的检测方法
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抗原-抗体反应:指抗原与相应抗体在体内、外发生高度特异性结合反应。由于实验所用的抗体存在于血清中,故又称血清学反应(serological reaction)
用于:抗原(微生物、细胞、激素、细胞因子、肿瘤标志物等)、抗体的检测。
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特异性
抗原抗体反应的可见性
适当的比例和浓度
可逆性
抗原抗体反应的特点
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应 用
1、利用已知抗原检测未知抗体
(1)检测病原微生物的相应抗体以辅助诊断疾病: 伤寒病、流行性乙型脑炎、AIDS病等。
(2)检测自身抗体—诊断自身免疫病:SLE、类风湿性关节炎等。
2、利用已知抗体检测未知抗原
(1)鉴定病原菌:诊断疾病
(2)检测肿瘤相关抗原:检测甲胎蛋白以诊断肝癌
(3)检测血型抗原、HLA抗原:鉴定血型,亲子鉴定
(4)检测药物半抗原: 确认运动员是否服用兴奋剂
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沉淀反应
补体参与反应
中和反应
2
3
4
1
免疫标记
凝集反应
2
4
3
5
Ag-Ab 反应的基本类型
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一、凝集反应(agglutination reaction)
概念:细菌、细胞等颗粒性抗原或包被有抗原的颗粒状物质(如聚苯乙烯乳胶等)与相应的抗体结合,出现肉眼可见的凝集团,称为凝集反应。
1、直接凝集:将细菌或红细胞与相应的抗体直接反应,出现细菌凝集或红细胞凝集现象。又分为玻片法和试管法。
2、间接凝集:将可溶性抗原包被在红细胞或乳胶颗粒表面,与相应抗体反应出现颗粒凝集现象。
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细菌的鉴定和血型的检查
检测病原体可溶性抗原,病原体感染后产生的抗体
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二、沉淀反应(precipitation)
概念:可溶性抗原(免疫球蛋白、细胞裂解物、组织浸液等)与相应抗体结合, 形成不溶性免疫复合物,出现不透明的沉淀物。在液体中进行出现絮状沉淀,在半固体琼脂凝胶上进行,形成白色的沉淀。
1.单向免疫扩散(single immunodiffusion)
2.双向免疫扩散(double immunodiffusion)
3.免疫电泳(immunoelectrophoresis)
4.免疫比浊(immunonephelometry)
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1、单向免疫扩散(single immunodiffusion):可溶性
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