生物化学实验指导（副本）.docVIP

生物化学实验指导 主 编：朴金花 副主编：江旭东 李 晶 编辑委员会： 王 昭 欧 芹 张 涛 张鹏霞 白大芳 杨 晶 王跃新 王明富 鲁 燕 李志伟 江旭东 李 晶 朴金花 目录 第一部分 生物化学技术概论 1.实验记录和实验报告的书写………………………………………………… 2.普通实验技术………………………………………………………………… 3.实验样品的制备……………………………………………………………… 4.离心分离技术原理及使用方法……………………………………………… 5.电泳原理……………………………………………………………………… 6.分光分析原理………………………………………………………………… 7. 层析分离原理………………………………………………………………… 8. 实验室规则 ………………………………………………………………… 第二部分 生物化学基本实验 实验一 维生素C的定量测定 ………………………………………………… 实验二 考马氏亮蓝G-250染色法测定蛋白质含量 ………………………… 实验三 蛋白质紫外分光测定法 …………………………………………… 实验四 血清脂蛋白琼脂糖电泳 ……………………………………………… 实验五 血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳 …………………………………… 实验六 血清蛋白质乙酸纤维素薄膜电泳 …………………………………… 实验七 pH对唾液淀粉反应速度的影响……………………………………… 实验八 碱性磷酸米氏常数的测定 …………………………………………… 实验九 改良Mohun法测定血清谷-丙转氨酶活性 ………………………… 实验十 氨基转移作用 ………………………………………………………… 实验十一 离子交换层析分离混合氨基酸 …………………………………… 实验十二 胡萝卜素的柱层析分离 …………………………………………… 第三部分 生物化学综合实验 实验十三 脲酶凝胶过滤分离…………………………………………………… 实验十四 血清蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳……………………… 实验十五 质粒DNA的??量快速提取………………………………………… 实验十六 多聚酶链式反应（PCR）技术……………………………………… 实验十七 蛋白质印迹分析（Western Blot）…………………………………… 实验十八 碱性磷酸酶比活性测定 ……………………………………………… 实验十九 四唑盐比色法（MTT）法……………………………………………… 实验二十 核酸的提取、定量测定 ……………………………………………… 实验二十一肝糖原提取与鉴定…………………………………………………… 第一部分 生物化学概论 本部分的内容为生物化学实验中所涉及的主要原理。介绍如何正确记录实验过程及书写实验报告的一般规则，是训练学生进行正规实验寻林的重要内容。普通实验技术包括玻璃仪器的洗涤，洗液的配制，吸量管的使用、混匀的方法以及过滤、离心等一般实验室技术。实验样品的制备着重讨论在生物化学实验中，血液、尿液样品及组织材料的采集和处理，匀浆制备和组织浸出液制备。离心分离技术、电泳原理、分光分析、层析分离技术，重点讨论这些重要技术的原理，内容则尽可能简洁扼要，作为具体实验内容的参考。 一.实验记录和实验报告的书写 实验是在理论指导下的科学实践，目的在于经过实践掌握科学观察的基本方法和技能，培养学生科学思维、分析判断和解决实际问题的能力。也是培养探求真知、尊重科学事实和真理的学风，培养科学态度的重要环节。 （一）实验记录 记录实验中观察到的现象、结果和数据，及时地记录在激烈路本上。原始数据必须准确简练、详尽、清楚。记录时不能夹杂主观因素，在定量实验中观测的数据，如称量物的重量、滴定管的读数、光密度值等，都应设计一定的表格，依据仪器的精确度记录有效数字。 完整的实验记录包括实验日期、实验题目、目的、操作、结果。 （二）实验报告 实验结束后，应及时整理和总结实验结果及记录，按照下列顺序写出实验报告： 实验名称（The title of experiment ）： 目的（Objective）： 原理（Principle）：最好使用简式。 操作步骤（Operational procedure）： 实验记录 计算与结果（Calculation and Results）： 讨论（Discussion）：对实验方法，实验结果和异常现象进行探讨和评论，以及对于实验设计的认识、体会和建议。 操作者姓名，实验日期。 二、普通实验技术 （一）玻璃仪器的洗涤与清洁 玻璃仪器的洗涤与清洁直接影响实验结果的准确性，因此玻璃仪器的洗涤工作是 很重要的 1