南京农业大学园艺育种学总论--第七章 诱变育种.pptVIP

二、化学诱变剂的种类 烷化剂： 甲基磺酸乙酯（EMS）,硫酸二乙酯（DES）, 甲基磺酸甲酯（MMS）,异丙基甲烷磺酸酯（iPMS）,芥子气类。 另外，亚硝基乙基脲烷（NEU）,亚硝基乙基脲（NEH）,亚硝基甲基脲烷（NMU）,乙烯亚胺（EI）, 1,4-双重氮乙酰丁烷,也是有效的诱变剂，但是是潜在致癌物质,应用危险。 * 二、化学诱变剂的种类 烷化剂： 核酸碱基类似物 常用的有5-溴尿嘧啶（BU）、5-溴去氧尿核苷（BUdR）、2-氨基嘌呤（AP）、马来酰肼（MH）等。 * 二、化学诱变剂的种类 烷化剂： 核酸碱基类似物 叠氮化物 叠氮化钠（NaN3）在一定条件下可获得较高的突变频率，而且安全，无残毒。 * 二、化学诱变剂的种类 烷化剂： 核酸碱基类似物 叠氮化物 嵌入剂 丫啶橙,二氨基丫啶 * 二、化学诱变剂的种类 烷化剂： 核酸碱基类似物 叠氮化物 嵌入剂 丫啶橙,二氨基丫啶 无机化合物 H2O2,亚硝酸等 生物碱 石蒜碱,秋水仙碱, 长春花碱等。 * 三、化学诱变源的机理 碱基类似物的诱变机制 碱基类似物的分子结构与天然碱基非常相似，它们能在DNA复制过程中掺入到DNA中，引起配对错误，从而由一种碱基对替换成另一种碱基对。 改变DNA结构的诱变剂:羟胺 烷化剂 亚硝酸 * 羟胺（NH2OH）：是一种重要的诱变剂，也是已知的最专一性的点突变诱变剂，只能与DNA中的胞嘧啶起作用，诱发G-C到A-T的转换 * 烷化剂： DNA的磷酸基是烷化作用的最初反应位置，反应后形成不稳定的磷酸酯，水解成磷酸和去氧核糖，致使DNA链断裂。 烷化基还使碱基发生烷化作用，造成G-C向A-T的转换或T-A向C-G的颠换。 * 亚硝酸 能使腺嘌呤（A）脱氨成为次黄嘌呤，次黄嘌呤不能与胸腺嘧啶配对，而与胞嘧啶配对，这样受亚硝酸处理的DNA分子中就有次黄嘌呤，经过DNA复制，使原来的A-T对转换成G-C对。 * 叠氮化物 NaN3是目前诱变效率最高的一种诱变剂，是一种点突变剂，与DNA的作用方式是碱基替换，因此处理种子最适宜的时间是DNA合成开始时。 嵌入剂 是一类能引起移码突变的化合物，它们都是扁平的三环化合物，大小和嘌呤-嘧啶对大致相等，它能结合到DNA上，并插入邻近的碱基之间，使DNA骨架变形，导致染色体配对交换过程中不等价交换，形成两个重组分子，一个多一个碱基对，一个少一个碱基对，造成识别和阅读错误产生移码突变。 * 四、化学诱变的方法 药剂的配制和处理方法 化学诱变效应的影响因素 安全问题 * 药剂的配制和处理方法 药剂配制：诱变处理时通常先将药剂配成一定浓度的溶液。 试材预处理 药剂处理 药剂处理后的漂洗：处理后要用流水冲洗植物材料10至30分钟，防止残存诱变剂对处理材料的损伤；也可使用一些化学‘清除剂’，如甘氨酸以解除氮芥的作用，硫代硫酸钠可解除DES(硫酸二乙酯)的作用。播种前防止种子风干，以免诱变剂浓缩，造成损害。 * 试材预处理 在化学诱变剂处理前，将干种子预先用水浸泡，可以提高其对诱变的敏感性。通常把种子浸入流动的低温无离子水或蒸馏水中。此外，将材料浸泡在生长素溶液中，有提高化学诱变的效应。 浸泡能提高细胞膜透性，加速诱变剂的吸收，同时使细胞代谢和合成活跃起来，促进DNA的合成，这个现象称水合作用。 * 药剂处理： 浸渍法： 涂抹或滴液法： 注入法： 熏蒸法： 施入法： * 影响化学诱变效应的因素 诱变剂的理化特性 被处理材料的遗传类型及生理状态 诱变剂的浓度和处理时间 处理的温度:一般宜在0至10℃下进行 诱变剂溶液pH及缓冲液的作用 一般常用磷酸缓冲液,其pH值控制在7~9范围内。 延缓诱变剂的水解速度，并抑制在吸收期生物体代谢的变化 * 安全问题 诱变剂都有程度不同的毒性，有的是潜在的致癌剂，因此在处理时避免与皮肤接触或吸入它的气体，一般多在具有通风管密闭条件的超净台上戴乳胶手套进行操作。 * * * * 细胞核细胞质 游离碱基核苷核苷酸DNA 诱变育种induced mutation breeding 诱变育种的概念、特点、和类别 辐射育种 化学诱变育种 * 诱变育种：是人为的利用物理和化学等因素诱发作物产生遗传变异，在短时间内获得有利用价值的突变体，根据育种目标要求，对突变体进行选择和鉴定，直接或间接地培育成生产上有利用价值的新品种的育种途径。 * 诱变育种的成就 根据FAO/IAEA联合处（1995）和我国（1995）年的不完全统计，已有51个国家在162种植物上育成推广了1932个品种，其中观赏植物45种，品种482个，果木20种，品种48个，蔬菜20多个种。 我国诱变育种于5