全自动生化参仪数设置.docVIP

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全自动生化参仪数设置

自动生化分析仪参数设置 目前大多数为开放式,一般另外留一些检测项目的空白通道由用户自己设定参数了解参数的基本 1.试验名称 常以项目的英文缩写来TP,白蛋白设置为ALB等。 2.方法类型 有终点法连续监测法等,根据被检物质的检测原理选择其中一种。 2.12.2连续监测法 2.3比浊法 自动生化分析仪一般只能做透射免疫比浊分析,当光线通过一定体积的含免疫复合物的溶液时,由于溶液中存在的抗原-抗体复合物粒子对光线的反射和吸收,引起透射光的减少,测定的光通量和抗原抗体复合物的量成反比。它常用于终点法测定,目前主要用于血清特种蛋白的检测,如载脂蛋白、微量蛋白、急性时相反应蛋白、免疫球蛋白以及某些药物监测等。但是如果样品中待测抗原浓度过高,抗原与抗体形成的免疫复合物分子将会变小,而且易发生解离,使浊度反而下降,因此免疫比浊分析过程中必须设置前区检查,比较分析过程中后两个读数点的差别,如果后一点比前一点的吸光度低,则表示抗原已过剩,应将样品稀释后重测。 3.反应温度 25℃、30℃、37℃三种温度进行恒温,根据需要可以任意选择,半自动生化分析仪恒温器属于这种。全自动生化分析仪的温度控制器一般只能控制37℃一种温度,少数也可以控制30℃和37℃两种温度。 4.反应波长 当测定体系中只有一种组分或混合溶液中待测组分的吸收峰与其他共存物质的吸收波长无重叠时,可选用单波长,如果待测物质有几个吸收峰,可选用吸光度最大的一个波长,或者选择在吸收峰处吸光度随波长变化较小的某个波长。当被检溶液混浊或存在较多的干扰物质时,测定过程中会出现光散射和非特异性光吸收,从而影响测定结果的准确性,此时可用双波长甚至多波长测定,以提高测定结果的准确性,而在实际应用中选择辅助波长主要用于消除脂血、溶血、黄疸的干扰。由于脂质、血红蛋白、胆红素在较宽的波长范围内有较强的光吸收,常常同测定波长有重叠,此时测得的吸光度包含待测物质的吸光度和干扰物质的吸光度,因此必须选用合适的辅助波长来消除干扰物质的吸光度。辅助波长的设置原则是根据测定波长选择辅助波长,要求干扰物质在测定波长同辅助波长有相同的吸光度。 5.反应方向 有正向反应和负向反应两种,吸光度增加为正向反应,吸光度下降为负向反应。 6.样品量最小样品量分析仪进样针能在规定的误差范围内吸取的最小样品量目前有至1.6μl的在样品含高浓度代谢产物或高活性酶浓度的情况下往往需采用分析仪的最小样品量作为减量参数,从而使检上限得以扩大总反应在不同的分析仪有一个不同的规定范围,180μl的反应液混合体,近年来又出现了点光源技术,它的光束更小,照射到样品杯时仅为一个点,可使反应液的量降至120μl。④试剂量/样品量比试剂量/样品量比。 7. 分析时间包括孵育时间7.1孵育时间 在终点法是样品与试剂混匀开始至反应终点为止的时间,在两点法是第一个吸光度选择点开始至第二个吸光度选择点为止的时间。孵育时间Trinder反应测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯时,由于37℃酶反应较慢,因此必须测定这些酶试剂反应达到终点的时间,自动分析仪用试剂盒一般可以在全部加样后5分钟内反应完全,所以应选择分析仪的最大反应时间。 7.2延迟时间 在样品与反应试剂(第二试剂)混匀开始至第一个吸光度选择点之间的时间。 7.3监测时间 8.计算因子(F值)和实测F值 用连续监测法进行酶活性测定时,不需作标准管或标准曲线,根据摩尔吸光系数很容易进行酶活性浓度的计算。先测定在线性范围内每分钟吸光度的变化(ΔA/min),以U/L代表酶活性浓度时,则可按下式进行计算: 式中V:反应体系总体积(ml);106:将mol换算成μmol;ε:摩尔吸光系数(cm2/mol); v:样品体积(ml);L:比色杯光径(cm)。当条件固定时,从理论上讲V、v和L均为固定值,ε值为常数,所以F值是恒定的。F值对酶的测定十分重要,过高虽然测定的线性较宽,但重复性差,反之精密度虽好,但检测线性窄,因此应根据实际情况进行合理的设置和应用。但是在临床实际工作中,仪器诸多因素如波长的准确性、半波宽的大小、比色杯光径及磨损与清洁度、温控的准确性、加样系统状况等若不符合要求或发生变化都会影响指示物的ε值或上述公式中的相关项,因此应在具体仪器条件下,定期检查和实际测定指示物的实测ε值和F值。因为纯NAD(P)H溶液不稳定,所以NAD(P)H的ε值需用葡萄糖己糖激酶法实测,实际操作为将某一浓度的葡萄糖溶液重复5-10次测定,得到相应的一组吸光度A值,求出±s,注意s必须低于规定的批内允许值,再根据下面两个公式分别计算出NAD(P)H的实测ε值和F值: ; 式中9.线性度 是非线性比率的界线,常用%表示,其计算公式为,式中:k1为连续监测时间2/3内前读数时间的斜率,k2为后2/3读数时间的斜率

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