(I)血细分析仪的检测技术及发展.docx

血细胞分析仪的检测技术及发展成都中医药大学附属医院检验科 　张朝明谈到血细胞计数仪的发展史，不得不提到在这个领域首开先河的人。他是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter，最初是一位广播电台的电器工程师，后来做过X光机的销售员和维修工程师，在亚洲许多国家包括我国的上海工作过。1948年他在芝加哥一家公司工作时，在一间地下室建立了自己的实验室，他发现了微小粒子通过特殊的小孔时可产生电阻变化这一现象，并根据这种电阻变化特点将其应用于微小粒子的粒度测量和计数上。科技界为表彰他的发明，将其称为库尔特原理（Coulter principle ），Coulter 先生将这个原理引入到血液细胞计数上，在1953 年获得美国发明专利，同年和他的兄弟约瑟夫（Joseph ）开创了自己的公司，并成功的设计和制造出了可以计数血细胞的专用仪器，然后开始了在这一领域的商业运作。近年来，随着先进仪器的普及应用和技术人员素质的提高，我国的检验医学事业有了飞速的发展。近10年来，各种类型的血液分析仪在国内迅速普及。血液分析仪的应用，不但提高了检验结果的质量和工作效率，而且为临床提供了更多更可靠的试验指标，对疾病的诊断和鉴别诊断起了重要的作用。同时也取得了较好的经济效益和社会效益。1．血液分析仪的发展传统的血液学检查：显微镜手工检验法。血细胞计数、白细胞分类结果准确性、可靠性受到一定影响，检验人员费时费力。1947年美国科学家库尔特（W.H.Coulter）发明了用电阻法计数粒子的专利技术。1956年他又将这一技术应用于血细胞计数获得成功，其原理是根据血细胞非传导的性质，以电解质溶液中悬浮血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础，进行血细胞计数和体积测定，这种方法称为电阻法或库尔特原理。60年代末血细胞分析仪除可进行血细胞计数外，还可以同时测定HBG血红蛋白。70年代计算机技术快速发展，将血小板计数的繁琐手续（手工分离富血小板血浆后在进行血小板计数），改进成血小板与红细胞同时计数。80年代，发展迅速，在8项检测基础上加上红细胞指数、三个直方图的报告，不仅提供是否贫血，且可对贫血的类型和原因进行分析；血小板参数对止血和血栓疾病的诊断及一些疾病的疗效观察有重要价值。开发了白细胞3分群血细胞分析仪。90年代，开发出五分类血液分析仪和可对网状红细胞进行计数的血细胞分析仪，同时，将激光、射频、化学染色计数应用于对细胞检测更成熟，发展成为血细胞分析流水线。2．白细胞分类技术的进展最早进行白细胞分类的设备仅根据白细胞的体积分布情况将淋巴细胞单独划分出来。在1970年起Coulter公司开始设计对白细胞进行分类的仪器，并首先推出了两分类的S-PLUS系列仪器，然后在1980年又推出了T系列，都是可进行白细胞两分群的仪器，大家比较熟悉并仍在使用的SysmexF800和F820型也是根据白细胞体积分布直方图进行粗略两分类的仪器。目前半自动或全自动型具有18参数含白细胞三分类的血细胞分析仪已经成为我国医院检验科的主流血细胞分析仪。仅仅根据简单的体积分析法就将血细胞进行分类，无论是三分类（3-partdifferential）还是两分类（2- partdifferential），其实是将细胞按照体积大小进行了简单的分群处理，实际上是不科学的，因此国内专家建议将此分类统一称呼为分群（group），即两分群型或三分群型血细胞分析仪。90年代中期以来，国外许多厂家已不满足于三分类型的血细胞分析仪，应用不同原理研制开发出具有五分类或更多项白细胞分析技术的全自动型血液分析仪器。2．1三分群血液分析仪的检测原理2．1．1电阻抗法血细胞计数利用血细胞通过微孔时瞬间的电阻变化产生脉冲电流而计数。白细胞、红细胞的稀释标本在一个负压的控制下，分别通过各自的计数微孔，流入各自通道，然后通过两个光电传感器，将细胞信号甄别、放大、计数。有关说明：（1） 微孔管：在其下端镶有一个标准尺寸大小的红宝石孔。RBC管道孔；80微米；WBC管道孔径：100微米。易堵塞，防止堵孔和维护。（2） 微粒计数：细胞以外的杂质将被误认为细胞计数。保证稀释液的质量和环境的洁净。（3） 细胞可相互重叠通过微孔，产生偏差：血样要充分稀释（WBC1：256，RBC1：5056），设计上要有纠正偏差的技术。2．1．2直方图的产生直方图是由测量通过感应区的每个细胞脉冲累积得到，是反映细胞大小异质性的资料。计算机将白细胞体积从30～450fl分为256个通道，每个通道1.64微升，样本中的白细胞依照大小被分别放在不同的通道中，由此，就产生了按照大小，数量绘制得直方图，将各个通道的峰值点用曲线相连产生报告。由三种细胞的直方图，经仪器内存程序可进一步分析的出：平均红细胞体积、红细胞分布宽度、平均血