家庭园艺组织培养技术分解.ppt

家庭组织培养所需设备 一个消过毒的，空气不流通的箱柜用于接种植株。将鱼缸竖放可作为一理想的接种箱。任何尺寸为50cm长、40cm高、40cm深的有机玻璃或玻璃容器都能轻易地将它做成接种箱。 家庭组织培养步骤 配培养基 外植体的消毒 接种 继代 生根 移栽 几个组培例子 紫罗兰的组织培养 源于种子的组织培养 一个酒精灯用于灼烧器具（避免使用甲醇，有毒！） 装有70％酒精的手持喷枪用于喷洒接种箱和其他表面。 含氯稀释溶液，如家用漂白粉稀释液，用于植物材料的表面消毒。 任何皮肤消毒剂如70％酒精。 基本培养基： 1、两杯雨水 2、1/4杯糖 3、肥料原料：1/2汤勺全价10:10:10 (N.P.K.)水溶液肥料定容1升：此配方取一杯原料。 4、肌糖片（500mg）：1/2片 5、含维生素B1的维生素片：1/2片－任何多维生素片都可用。 6、琼脂片：4汤勺。 特殊添加剂：对于制备增殖和生根培养基需加入1/2杯椰汁和1/2杯麦芽。用1/2杯青番茄汁或1/2杯新鲜桔子榨汁代替椰汁可能产生不同反应。 有条件的话可直接购买植物生长调节剂。 培养基的配制： 将各成分混合到有盖的深锅内，逐渐煮沸直至琼脂溶解，加热时需不断搅拌以防琼脂粘锅并烧焦。 利用精密pH试纸确认培养基的pH总在5和6之间。如果需要调整pH，则用酸如柠檬酸或碱如小苏打。用长柄勺分装到空瓶内，培养基约2cm厚。 盖上盖子并放入高压锅灭菌。压力到达后（以压力筏开始放汽为准）持续15分钟。 器械灭菌和其他： 镊子和解剖刀可被包在铝制饭盒内，并在压力锅煮沸15分钟达到灭菌效果。同样，它们也可采取用含氯溶液冲洗或在酒精中沾后灼烧的方法灭菌。 无菌水是用以清洗植物材料和湿润用于工作的清洁平台――无菌纸巾。操作可在纸巾上完成。当操作完成后，可丢弃该纸巾并从灭菌袋中取一新纸巾。无菌水在玻璃罐中灭菌。将纸放入纸袋并将之放在高于水平面处的高压锅内灭菌。袋子在灭菌后变得很湿，需放入80度的烤箱烘干。用前不要打开袋子。 植物材料的灭菌 所有的材料都可在稀释的家用漂白粉中消毒，（1/4杯漂白粉精片（碾碎）＋3/4杯水＋1滴洗洁精――洗洁精作为表面活化剂）。将植物材料投入含有漂白粉的罐子里10－20分钟。不时晃动它。最后倒掉含氯溶液，这一过程将杀死细菌、真菌并且有时会杀死部分植株如外部芽和柔嫩的苗。用无菌水冲洗材料两次。 接种箱的操作 为保证你的培养是无菌的。需按以下几点操作： 1、将你的头发梳理到脑后，卷高你的袖口并摘去你的手表和其他首饰。用皮肤清洁剂彻底冲洗你的双手。如果对任一消毒剂过敏，用水洗手，戴手术手套。 2、用70%酒精喷洒接种箱内部，用无菌织布擦干。 3、将所有你需要的东西收集并有条理地摆放在接种箱内或边上。 4、在接种箱内，用镊子（不要用你的手接触植物材料）从罐子中取出无菌的切段。同样，你的器械在每次操作后要在酒精中沾过，并用火焰灼烧消毒。带几张叶片，2－3cm的小块可以切开后接种到琼脂培养基上。如果叶片太大，去掉它们或是将它们切成1/3-1/2大小。每只容器中接入一个苗（在这个阶段中为防止污染扩大，一容器一苗是重要的）。然后盖上盖子。将罐子储藏于室温，避免阳光直射。培养苗一个月。 这期间将发生三件事：一些苗被含氯溶液或被其本身产生的毒素杀死；一些被真菌和细菌污染；再是新苗从没污染容器中的切段轴部迅速生长。将死的和污染的培养物弃去。 苗的增殖 前期得来的苗可能会在之后的4个星期内长长。它们需要被转移到含有椰子汁的培养基内（椰子汁中含有一些能使植物切段长出许多芽的生长促进成分）以便进一步增殖。 1、象前面一样重复对培养基容器和接种箱的准备和灭菌步骤。在此之前，你的手也需消毒。 2、将长有芽的容器放到接种箱的一边，另一边放灭了菌的培养基。 3、象以前一样用无菌的纸巾、解剖刀和镊子。 4、用镊子从容器中夹取一切段，并在用无菌水湿润的无菌纸巾上切割。重要的是在湿润的纸巾上做所有的操作，因为这些植物体非常软且易变干。分离的苗被转移到新的容器中。在这一阶段，每个容器内可接种5枚切段。 5、和前一阶段一样进行培养。 扩增阶段可每4个星期重复一次，直到得到足够的苗。按一般规律，每4个星期苗增加3－4倍。这儿需注意的重要一点是这一阶段期间高污染率意味着你正因糟糕的卫生状况引起空气传播的污染。 根的形成 一旦你有了足够的苗，让它们长到至少2cm再进入生根阶段。将这些苗转到含有椰子汁和麦芽的生根培养基内。每个容器内接种5个以内的苗。将这些容器存放到从前放置的地方。根在2－4周内形成。 转移到混合盆栽（炼苗） 这一阶段的操作在开放的工作台上进行。生根的培养物按以下步骤处理： 1、将不含任何肥料和水的合适的盆栽基质装入盆中。要能排水。 2、用镊子将生根苗从琼脂培养基中取出。 3、用微温