课件38尿素纤维素分解讲述.ppt

背诵以下内容 1、培养基的分类？ 2、培养基的成分有哪些？ 3、消毒和灭菌的区别及其常用方法？ 4、培养基制备步骤？ 5、微生物常用接种方法？菌种保存方法？ 课本P30　练习2.流程图表示如下。 土壤取样→选择培养（此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定）→梯度稀释→将菌悬液涂布到有特定选择作用的培养基上→挑选单菌落→发酵培养 * 习题处理　学案53　　7、11、12 优化大本P227　1　P231　　3 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 课题3 分解纤维素的微生物的分离 项目 内　容 要求 考点 1.微生物的实验室培养 2.土壤中分解尿素的细菌分离与计数 3.分解纤维素的微生物的分离 Ⅱ Ⅰ Ⅰ 重难点 微生物的培养和分离方法及微生物培养的具体操作 1、尿素的利用 尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。 2、细菌利用尿素的原因 土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶 CO(NH2) 脲酶 + CO2 NH3 + H2O 一、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 （一）筛选菌株KH2PO4 1.4g NaHPO4 2.1g MgSO4 H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g 琼脂 15.0g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。 该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？ 此配方能否筛选出产生脲酶的细菌？为什么？ 碳源：葡萄糖、尿素 氮源：尿素 能。只有产生脲酶的 细菌能利用尿素作为氮源而生存。 学案54　例1 思考：怎样证明此培养基具有选择性呢？ 以尿素为 唯一氮源 的培养基 牛肉膏 蛋白胨 培养基 （全营养） ?是 分离 尿素 细菌 判断该 培养基 有无选 择性 实验组 对照组 培养基类型 是否 接种 ?目的 ?结果 只生长尿素细菌 生长多种微生物 是 （二）统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计一定容积的样品中微生物数量。 ②方法：用计数板计数。 ③缺点：不能区分死菌与活菌。 ②计算公式： 每克样品中的菌株数 C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL) M代表稀释倍数 (2)活菌计数法（稀释涂布平板） ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 学案54　巩固练习2 看课本P22，并讨论你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，错在哪？ 第一位同学：没有重复实验（至少涂布3个平板） 第二位同学：A组结果误差过大，不应用于计算平均值 注意事项 ①选择菌落数在30～300的平板上计数。 ②需培养计算出三个或三个以上的平板菌落求平均数。 ③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。 (三)设置对照实验 阅读P22～23页“（三）设置对照”一段讨论教材中提出的问题。 设置对照的目的： 排除实验组中非测试因素对试验结果的影响，提高实验结果的可信度。 (1)A同学出现此结果的可能原因？ ⑴土样不同 ⑵培养基污染 (或混入了其他的含氮物质) (2)设置对照实验，帮助A同学排除上述两个可能影响实验结果的因素？ 这个实例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少 方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验 方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。 结果预测：如果结果与A同学一致，则证明______；如果结果不同，则证明A同学存在__________________ __________ A无误 培养基的配 制有问题。 完成学案54　3设置对照　填空 土壤取样 → 样品稀释 → 取样涂布→ 微生物培养 → 观察并记录结果 → 细菌计数 （四）实验设计 细菌分离与计数的实验流程 阅读课本P23－24资料一、二、三 样品稀释涂布平板 稀释倍数为 101 ～106。每个稀释度均用3个选择培养基和1个蛋白胨培养基。 [一]无菌操作 1、取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌。 2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。 3、在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。 [二]做好标记 注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。 [三]制定计划 （五）操作提示 （六）结果分析与评价 1.培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落？