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- 2017-04-10 发布于湖北
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病毒感染的实验室诊断
病毒感染的实验诊断方法
病原学诊断
病毒分离培养
显微镜检查
抗原检测
核酸检测
血清学诊断
抗体检测 IgM、IgG
一、标本采集与运送
(一)标本采集
采集时间:尽早采集(越早越好)
标本种类:根据感染的部位、可能感染的病毒类型选择
(二)标本的运送与保存
1.低温送检
4℃可保存数小时
-70℃可长期保存
-10 ~ -20℃下病毒易灭活,不可用于保存病毒标本
对冷冻标本应避免反复冻融
2.保湿送检
50%甘油盐水保存送检
病毒转运培养基(virus transport medium ,VTM)含0.5%明胶或牛血清白蛋白的Hank’s液
3.无菌送检
抑制细菌生长 100U/ml青霉素+100μg/ml链霉素
抑制真菌生长 2.5μg/ml二性霉素B 或40 μg/ml制霉菌素
二、病毒的分离与鉴定
(一)病毒分离和鉴定的一般程序
(二)病毒的分离
组织培养
鸡胚培养
动物接种
1.组织培养
将人或动物离体的活组织或分散的活细胞在体外人工控制的条件下使其生长繁殖的一种技术。
组织培养的类型
(1)组织块培养
(2)器官培养 人胚气管-呼吸道病毒;人胚肠-肠道病毒
(3)细胞培养 最常用
原代和次代细胞培养
二倍体细胞培养
传代细胞培养
动物新鲜组织(人胚肾等)→胰酶消化→营养液培养→单层细胞(原代细胞)
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