D-二聚体检测的临床应用讲解.ppt

Page ? * 当纤维蛋白凝结块形成时，在tPA（组织纤溶酶原激活物）的存在下,纤溶酶原激活转化为纤溶酶，纤维蛋白溶解过程开始，纤溶酶降解纤维蛋白凝结块形成各种可溶片段，形成纤维蛋白降解产物(FDP)，FDP由下列物质：X-寡聚体、D-二聚体、中间片段、片段E组成。 Page ? * Page ? * 凝血系统的激活导致凝血酶生成，凝血酶结合于纤维蛋白原的中央结构域，释放纤维蛋白肽A（FPA）和纤维蛋白肽B（FPB），生成纤维蛋白单体和多聚体。在活化FXIII的作用下，生成交联的纤维蛋白。纤溶酶降解交联纤维蛋白，生成多种交联的纤维蛋白降解产物（FbDPs），其中包括D-D和其它的片段 测定方法：有胶乳凝集法、 ELISA、免疫渗滤法、免疫比浊法等，唯有免疫比浊法敏感性高、定量、快速、简便。 全自动血凝仪利用散射光免疫比浊法定量测定D-二聚体， D-二聚体是交联纤维蛋白的降解产物之一， 继发性纤溶的特有代谢物。 Page ? * 目前有超过30种检测方法在使用 （1）免疫比浊法原理 Page ? * （2）检测设备 Sysmex CA1500 全自动血凝分析仪 当混合标本中含有D-二聚体时，聚苯乙烯颗粒包被到单克隆抗体，与交联纤维蛋白降解产物（D-二聚体）的交联区域结合。单克隆抗体能触发凝集反应，随后检测浊度的增加。仪器在800nm处通过对浊度改变的监测，将吸光度转换成浓度值，由此获得样本中D-二聚体的量。 （3）配套试剂 西门子公司INNOVANCE D-Dimer试剂 D-Dimer 试剂 D-Dimer 缓冲液 D-Dimer 补充试剂 D-Dimer 样本稀释液 （4）参考区间 0～0.55mg/L （5）可报告范围 （0.1～43.2）mg/L （6）定标范围 （0.16～10.14）mg/L 如上图定标曲线所示，定标范围（0.16～10.14）mg/L，若D-Dimer值超过10.14mg/L需要选择仪器自带的1/8稀释进行检测。 若1/8稀释结果依然测不出，则需要进行手工稀释，稀释液用D-Dimer配套试剂中白盖样本稀释液。 仪器出现Range Over报警信息需进行1/8稀释 D-二聚体检测的注意事项 采血时，一般要在病人空腹、安静状态下进行，以早晨07:00至09:00最为适宜，因为生物钟时间对检测指标有一定的影响。t-PA和PAI-1有较大的昼夜变化，对于多次反复采血的病人最好在同一固定时间和同一条件下采血。 采血时尽量不用止血带束扎或扎带压力要小，束缚时间要小于5min，压力大和束缚时间长会激活凝血机制，使凝血因子活性增高，内皮细胞释放t-PA，激活纤溶系统而引起纤溶活性增强，造成假阳性结果。采血人员应技术熟练，一针见血，防止组织过多损伤，纤维蛋白肽A在稍有组织损伤时，可导致结果改变。 标本必须立即送检及时检查，时间过久引起血浆中凝血因子被活化且有纤溶酶被激活，从而导致交联纤维蛋白的形成并随之发生降解，使D-二聚体产生过多 D-二聚体检测的注意事项 静脉采血需用含0.109mol/L枸橼酸钠抗凝管采集，枸橼酸钠与血液标本比例为1:9，抗凝剂的量要准确。如抗凝剂量减少会使D-二聚体值偏高，抗凝剂量增多会使D-二聚体值偏低，失去检测的准确性。 抗凝剂：草酸盐、EDTA、肝素不适用于凝血检查。 标本采集处理不当,如血与抗凝剂未充分混匀，出现凝块，混匀时过分用力，使标本溶血，造成结果异常。 纤溶药物的影响，如双香豆素、链激酶、尿酶等。 某些药物，如口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等影响测试结果 影响D-二聚体的因素 项目 阳性率（%） 新生儿 新生儿（黄疸) 100.0 孕妇 孕周30-38 60.0 临产 80.0 妊高症、子痫 66.1-100.0 脑血管病 脑栓塞（含脑血栓形成） 57.1-71.4 脑溢血 0.0-100.0 冠心病 高血压、心肌缺血 6.1-34.6 心肌梗塞 72.2-83.3 恶性肿瘤 实体瘤 69.0-74.0 白血病 78.9-100.0 项目 阳性率（%） 肝脏病 急性肝炎 48.1 慢性肝炎 28.0 肝硬化 70.6 肾脏病 急性肾炎 50.0 慢性肾炎 25.0 肾病综合征 61.5 尿毒症 100.0 外科（骨科） 手术、创伤后 96.3 DIC DIC（各种类型） 93.0-100.0 不同类型手术后D-二聚体的变化 手术类型 峰值时间 峰值水平 恢复正常时限 Ⅰ型 腹壁手术 ─ ─ ─ Ⅱ型 腹腔内手术 第 7 d 1.5mg/L 第 25 d Ⅲ型 腹膜后或肝脏手术 第 7 d 4.0 mg/L 第 38 d 正常情况下，D-二聚体在达到峰值水平后通常是以6%/d的速度清除，因此通过观察D-二聚体