基因工程原理复习资料汇编.docx

0、基因工程的技术基础和理论基础1）理论基础：40年代确定遗传信息携带者，即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质，明确了物质基础50年代确定DNA的双螺旋模型和半保留复制机理，明确自我复制和传递60年代提出中心法则和操纵子学说，破译遗传密码，阐明信息流向和表达。2）技术基础：60年代的琼脂糖凝胶和Southern转移杂交技术，用于DNA分离和检测60年代初70年代末，发现限制性内切酶和DNA连接酶，实现体外切割70年代中期，实现DNA分子的核苷酸序列分析技术80年代实现体外重组DNA并进入宿主细胞1、基因工程研究的主要内容或步骤从生物有机体基因组中，经过酶切消化或PCR扩增等步骤，分离出带有目的基因的DNA片段；在体外，将带有目的基因的外源DNA片段连接到能够自我复制载体分子上，形成重组DNA分子；将重组DNA分子转移到适当的受体细胞（寄主细胞），并与之一起增殖；从大量细胞繁殖群体中，筛选出获得了细胞重组DNA分子的受体细胞克隆；从这些筛选出来的受体细胞克隆，提取出已经得到扩增的目的基因，供进一步分析研究使用；将目的基因克隆到表达载体上，导入寄主细胞，使之在新的遗传背景下实现功能表达，产生出人类所需要物质。2、三位一体的基因概念基因既是携带生物体遗传信息的结构单位，又是控制一个特定性状的功能单位。基因是染色体上的实体基因象链珠(bead)一样，孤立地呈线状地排列在染色体上基因是功能、突变、交换“三位一体”的最小的、不可分割的、基本的遗传单位。3、一位一体的基因概念基因是一个具有特定功能的、完整的、不可分割的最小的遗传单位。基因内可以较低频率发生基因内的重组和交换。4、顺反子假说1个顺反子决定1条多肽链。能产生1条多肽链的是1个顺反子，Cistron是基因的同义词。在一个顺反子内，有若干个突变单位：突变子(muton)。在一个顺反子内，有若干个交换单位：交换子（recon）。5、全同等位基因在同一基因座位(locus)中，同一突变位点（site）向不同方向发生突变所形成的等位基因(homoallele)。6、非全同等位基因在同一基因座位（locus）中，不同突变位点（site）发生突变所形成的等位基因(heteroallele)。7、重叠基因的概念及其生物学意义概念：大多数由一条DNA序列组成的基因，仅有编码一种蛋白质的功能(尽管基因在两端有非编码区，并且在编码区内有内含子)。但是，有些情况下，一条序列编码不止一种蛋白质。生物学意义：a)原核生物进化的经济原则(较小的C值编码较多的基因信息)；b)提高蛋白质的疏水性,以增强生物体自然选择的适应性。8、重复基因的概念及其生物学意义概念：在染色体组上存在多份拷贝的基因。重复基因往往是生命活动中最基本、最重要的功能相关的基因。生物学意义：a)含有遗传调控信息:一些基因呈高度重复排列，如核糖体ｒＲＮＡ基因。这些基因的重复排列方式可以快速、大量地表达出蛋白产物，从而满足机体的需要；调控基因复制、转录、翻译。核酸碱基的错配更正，损伤修复，也受重复序列的影响。重复序列还可以形成核酸的高级构象，进而进行各种表观遗传修饰。b)促使核酸包装成各种高级结构:重复序列能够特异性地结合一些蛋白质，从而使核酸序列形成二级、三级甚至更高级结构。c)通过染色体的异染色质化而关闭基因的表达d)维持重要基因的正常结构，保证生命活动的正常进行：大量的重复序列保持重要的编码基因相对稳定，这才能维持正常的生命活动；e)为遗传变异和新基因的生成提供了空间，产生进化的动力：新变异或者新基因经常出现在容易发生突变与重组的重复区域，既不会破坏原来的遗传信息，又可以提供突变进行的场所，产生新性状。9、断裂基因的概念及其生物学意义概念：真核生物的结构基因是由若干exon和intron相间隔排列的序列组成的间隔基因（断裂基因）。a)Intron并非“含而不露”；b)Exon并非“表里如一”；c)并非真核生物所有的结构基因均为splittinggene。生物学意义：有利于遗传的相对稳定:即使错误剪接留下的intron部分,被mRNA监测系统降解,避免病变和死亡；增加变异机率，有利于生物的进化：内含子增加了基因的长度，增加了基因内的重组交换几率，有利于形成变异和生物多样性；扩大生物体的遗传信息储量：对Exon和intron不同方式的剪接（选择性剪接），形成不同的基因产物；通过改变读码框架，利用intron编码基因。10、跳跃基因的概念及其生物学意义概念：跳跃基因也叫做转座子，是一些能够从一个染色体位置转移到另外的位置的DNA序列。跳跃基因在生物体中广泛存在。生物学意义：转座子对基因而言是一个不稳定因素，他可导致宿主序列删除、倒位或易位，并且在基因组中成为可移动的同源区。产生新的变异，有利于进化。目前转座子元件是植物分子生物学操作和植物基因工