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免疫组织化学技术;;基本原理： 抗原抗体反应;;第一节 抗原 1. 概念 凡能刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答；并能与相应的在体内或体外发生特异性结合的物质称为抗原（ Antigen，Ag ）。;刺激机体免疫系统; 抗原主要具有两方面的特性，抗原能引起机体产生抗体（和/或致敏淋巴细胞），称之为免疫原性； 抗原还与相应的抗体（及致敏淋巴细胞）发生特异性结合或反应，称为免疫反应性。 ;; 2.抗原的化学结构 一个天然抗原具有二种结构， 一是高分子的载体（免疫原性） 二是抗原决定簇（特异性）;3.抗原的性质 异物性、大分子、特异性为抗原的共同性质，凡种系越远、分子量越大、构型越复杂、抗原决定簇暴露越多，则其抗原性越强，特异性越高。。 ;抗原的免疫原性;异物性;理化特性 1.抗原的分子大小;; 2.抗原分子的化学组成和结构; 3.物理性状 　*含芳香族氨基酸较多的蛋白质，免疫原性强，反之则较弱 *聚合体蛋白质分子：免疫原性强 *单体可溶性蛋白质分子：免疫原性弱 　; ;免疫反应特异性的物质基础---抗原决定簇(antigenic determinant)或表位(epitope)： 　　是指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。 ;;共同抗原表位与交叉反应; 抗原的类型繁多，分类方法也很多，故抗原的名称各种各样。 根据溶解性抗原有可溶和不溶性两类。;抗原的种类;第二节 抗体 1.抗体的概念 抗体（antibody）是机体受抗原刺激后通过体液免疫应答，由B淋巴细胞活化、增殖、分化的浆细胞合成并分泌的，能与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）。;有关概念; 抗体是免疫球蛋白，而免疫球蛋白不都具有抗体活性。 抗体是生物学和功能上的命名， 而Ig是结构和化学本质上的概念。;免疫球蛋白的基本结构 (一)重链（heavy chain，H） 2条 轻链（light chain，L） 2条 (二)可变区（variable region, V区） 恒定区（constant region, C区） (三)铰链区（hinge region） (四)结构域; ①Ig单体的基本结构是由二条相同的轻链和二条相同的重链组成，各自链间（轻–重或重–重链）由二硫键（–S–S–）相连接，呈Y字构型（图解） ;;基本结构;;;抗体的基本结构 ③人类Ig有五类， 即IgG、IgM、IgA、IgD、IgE，是由其分子结构中相应的重链（H链）— γ、 μ、 α、 δ、 ξ 决定的。 重链不同，Ig的类型就不同。; 抗体的特性 ①Ig都是大分子蛋白质，既具有免疫原性，又具有能与相应抗原结合的抗体活性。?; ② 免疫原性的类属特异性是由Ig分子的重链和轻链恒定区特定的氨基酸序列所决定。 抗体特异性结合抗原的活性位点存在于Ig的可变区。;③Ig由B淋巴细胞衍生的浆细胞生成，主要以可溶性蛋白的形式存在于体液中。 ④Ig的主要生物学功能有：特异性结合抗原；活化补体；结合Fc受体等。 ⑤一个（IgG）抗体分子具有两个抗原结合位点（两价）。;　血清型;免疫球蛋白水解片段 1.木瓜蛋白酶（Papain） ? IgG Fab段(fragment of antigen- binding,抗原结合 片段) Fc段（fragment crystalizable,可结晶片段） 2.胃蛋白酶（Pepsin）? IgG F( ab′)2 pFc ′ 3.意义：阐明Ig分子生物学作用； 构建基因工程抗体。 ;酶水解免疫球蛋白示意图;抗体的种类 ⑴依来源分━①免疫抗体； ②天然抗体；③自身抗体。 ⑵依反应分━①完全抗体；②不完全抗体。 ⑶依制备方法分— ①多克隆抗体； ②单克隆抗体； ③基因工程抗体。;;;McAb and PcAb;;抗体的类型; 抗体的购置及注意事项 1.抗体的购置 目前商品化抗体已有上千种，一种抗体可以有数家公司生产，其质量的好坏也存在很大差异，首先应选择一家好的生产公司，根据文献提供的信息，选择所需试剂的型号。;2.购置抗体的注意事项 (1)种属：单克隆抗体，多克