22免疫学检测技术基本原理.pptVIP

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22免疫学检测技术基本原理

第一节 体外抗原抗体结合反应的特点及影响因素 第二节 检测抗原和抗体的体外试验 第三节 免疫细胞功能的测定;第一节 体外免疫反应的特点及影响因素※※ ;(二)抗原抗体反应的影响因素 电解质 抗原抗体等电点分别为pH3-5和pH5-6,在中性或弱碱性条件下表面带有较多负电荷,适当浓度的电解质会使它们失去一部分负电荷而相互结合; 温度 通常为37℃,适当提高反应温度可增加抗原与抗体分子的碰撞机会,但56℃以上可使抗原或抗体变性失活; 酸碱度 抗原抗体反应的最适pH值在6-8之间,pH值过高或过低均可直接影响抗原抗体的理化性质。当pH值接近等电点时,抗原抗体多带正负电荷相等,由于自身吸引而出现凝集,导致非特异性反应。;第二节 检测抗原和抗体的体外实验 ;;;1.凝集反应;间接凝集反应;2.沉淀反应;沉淀反应—免疫电泳;3.免疫标记技术;①免疫酶测定法;免疫组化技术;②免疫荧光技术;③放射免疫测定;⑤免疫胶体金技术;⑥免疫印迹法-Western blotting;4.蛋白质芯片技术;第三节 免疫细胞功能的检测 ;外周血单个核细胞的分离;磁珠分离法;免疫吸附分离法 ;磁珠分离法;流式细胞术 ;抗原肽-MHC四聚体分离技术;二、免疫细胞功能的测定;T细胞功能测定;B细胞功能测定;细胞毒试验;凋亡细胞检测法;巨噬细胞吞噬试验;细胞因子检测;检测B细胞产生的抗体

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