生化分析方法[熊].pptVIP

指导老师：张宏 姓名：熊昱;什么叫生化分析;生化分析是进行生命科学研究的一个重要手段，在生物医药研发、临床生化诊断、生化产品生产等领域起着越来越重要的作用，是一门理论与实践相结合的综合性技术。;发展进程;;氨基酸蛋白质的分析方法;1.氨基酸类药物分析 ;1.1柱前衍生法;1.2柱后衍生法;1.3其他衍生方式;;2 酶类分析 ;·;超氧化物歧化酶;【酶活测定】在25℃ 4.5ml 50mmol／L pH8.3的K2HPO4- KH2PO4缓冲液中加入待测SOD样液，再加入10ul 50mmol／L的连苯三酚，迅速摇匀，倒入光径lcm 的比色杯，在325nm波长下每隔30s测一次A值。同时测定Sigma公司的SOD标准品，对所测样品SOD活性进行校正。 【酶活定义】在1ml反应液中，每分钟抑制连苯三酚自氧化速率达50％时的酶量为一个酶活单位， 即325nm 0.035OD／min为一个酶活单位。;;Jones应用硫代氨基甲酰--酪蛋白荧光底物使胰蛋白酶、胃蛋白酶的检测灵敏度提高了几十倍； 张东裔等以对甲苯磺酰基精氨酸甲酯(TAME ) 为底物，以 苯酚红指示剂在特定波长下光吸收值的变化作为测定胰蛋白酶效价的指标， 相对于药典中以消耗氢氧化钠体积为指标，这种方法更加简便灵敏； 此外， 通 过选择不同的底物和指示剂 ， 此法还 可用于测定其 它蛋白酶的活性 ， 从而建立一 系列以指示剂为基