反义RNA研究进展.pdfVIP

1 1 ? ? Ξ 内江师范学院学报 第19卷第4期 　　　　　　　　　　 JOU RNAL O F N E IJ IAN G TEACHERS COLL EGE No 4 Vol 19 反义 RNA 研究进展 唐正义1, 胡　蓉2 (1. 内江师范学院 化学与生命科学系, 　四川　内江　641112; 2. 内江师范学院 学报编辑部, 　四川　内江　641112) 　　摘　要: 反义 RNA 广泛存在于各类生物中, 它作用于 DNA 的复制、转录、转译的过程, 实现对基因表达 的调控。目前人们利用反义 RNA 这一特点, 在动植物、微生物以及医药等领域对生物基因进行有效调控, 取 得了令人瞩目的成就。 关键词: 反义 RNA ; 作用机理; 基因干扰 中图分类号: Q 522　文献标识码: A 　文章编号: 1671- 1785 (2004) 04- 0030- 06 　　20世纪50年代发现了mRNA、tRNA、rRNA。60年代末期,O grel, C rick 等[1 ] 提出了生命起源的 RNA 学说; 1978年哈佛大学 Zam ecnik 等利用一段13个碱基序列的反义DNA 成功地抑制了 Rous 肉瘤病毒 (R SV ) 的复制, 引起人们极大的关注。1982年以后, Cech、A ltm an 以及N oller 等人, 证实了 RNA 的催化 作用后, RNA 学说才引人注目, 把 RNA 的研究推向生物学研究的前沿。 反义RNA 是指与mRNA 或DNA 互补的小型单链RNA 分子, 其长度一般不到200个核苷酸, 它导 入靶细胞后, 形成DNA RNA 或mRNA RNA 杂交双链, 从而抑制基因表达, 达到基因控制的目的。 反义 RNA 广泛存在于各类生物中, 在20世纪80年代初,M izuno 等在研究大肠杆菌外膜蛋白 (Omp) 基因 表达时, 发现反义 RNA 可抑制Omp 的 mRNA 转译。后来研究发现反义 RNA 调控系统普遍存在于原 核生物中, 如质粒的复制、转座子的转座作用、某些病毒的繁殖等。至20世纪80年代中期证实反义 RNA 也存在于真核细胞中, 并参与基因表达调控。随着反义 RNA 的发现及其深入研究, 反义 RNA 技术已被 应用于生物基因调控的研究, 并广泛应用于动植物、微生物以及医药等领域。 1　反义 RNA 作用机理 1. 1　反义 RNA 在原核细胞中的作用 1. 1. 1　在DNA 复制水平上的控制　在大肠杆菌的质粒 Col E1的复制中, 复制起始时, 距起始位点- 555bp 处转录一段引物 RNA + (正义 RNA ) , RNA + 促使 Col E1的复制原点处双螺旋DNA 解旋, 继而 与DNA 模板结合, 引导DNA 多聚酶在 RNA + 的3′端接上脱氧核苷酸合成新的DNA