微波快速石蜡制片的实例运用.pdfVIP

山地 农 业 生物 学报 31(3)：271～274，2012 Journal of Mountain Agriculture and Biology 微波快速石蜡制片的实例运用木 李祖任，晏升禄，崔 丽，徐 爽，廖海民 (贵州大学 生命科学学院，贵州 贵阳 550025) 摘 要：以美洲商陆为试验材料，借鉴传统石蜡制片技术流程，应用微波技术，对固定、脱水、透明、浸蜡等步骤进 行改进 ，使试验周期缩短为两天以内。结果表明：采用微波快速石蜡制片法获得 了染色清晰、组织完整的解剖结 构，与传统石蜡制片法的效果相 同。 关键词：微波；石蜡切片；美洲商陆；解剖结构 中图分类号：Q944 文献标识码 ：A 文章编号：1008—0457(2012)03—0271—04 传统石蜡制片技术是植物显微技术上最重要、 美 的微 波 炉 MP17C—KE；恒 温水 浴 锅；Motie 最常用的一种方法，因其能够切成较薄而连续的切 BA200显微照相系统 。 片，受到植物解剖学者的欢迎 J。但传统石蜡法的 1．2 方法 操作步骤比较复杂，试验周期大约需要 9d，易受条 1．2．1 固定 将新鲜的美洲商陆叶片切成长为 3 件限制，而且制片中使用化学试剂较多，有些试剂 cm、宽约 1em的片段，其 中包括主脉；将根和茎切 对人体有一定毒害，制片成本较高 。因此，改进 成长、宽、高各为 1～2am的类似长方体片段，其 中 传统石蜡法，缩短试验周期，对提高植物制片效率 一 面保留其表皮。一部分按传统石蜡法 制作一 和质量有较大意义 。微波技术在动物组织石蜡切 组商陆叶片、根和茎的解剖结构，作为对照；另一部 片和病理组织石蜡制片中已经得到广泛应用，但在 分片段放人小玻璃瓶中，加人大于体积片段体积 植物组织石蜡制片中应用很少，现在还处于摸索阶 2O倍以上的FAA固定液(甲醛：冰乙酸：70％乙醇 段 。在 国外，Deniseet．al 和 Sehichneset．al 以 = 1：1：18)，并确保片段完全浸没在固定液中。将 玉米 (Zeamay)的花和 叶为试材对微波石蜡制片 小玻璃瓶放入塑料烧杯中，再向塑料烧杯 中倒人跟 技术进行了初步研究，得到比较完整的玉米组织解 固定液平齐的75℃热水 (下面每次都要与小玻璃 剖结构；在国内，魏欣悦等 以采用水稻 (Oryzas口一 杯的液体平齐)。将塑料烧杯放入微波炉中，调到 tiva)叶片为试材，进一步探讨 了微波石蜡制片技 低火挡处理 15rain，更换固定液和热水，重复 2次。 术。本研究 旨在进一步改进微波石蜡制片技术，减 1．2．2 脱水 固定处理后，倒掉固定液。将装有 少试验 限制条件 ，使该技术能进一步得到推广 。 小玻璃烧杯的塑料烧杯放人微波炉中，调到中低火 挡(解冻挡)处理。本试验所用的FAA固定液用 1 材料与方法 70％酒精配置，所 以起始脱水酒精浓度为 70％。 经酒精浓度为 70％、85％、95％、100％ I、100％ Ⅱ 1．1 材料 的梯度脱水，各 15—60S，每次更换 75oC热水。在 试验材料美洲商陆 (P olaccaamarican)为贵 更换95％酒精时加入少许番红，以下每步更换都 州大学校 园内野生 ；LeicaRM2015转轮式切片机 ； 要更换75℃热水。 收稿 日期：2012—01—12：修 回日期：2012—05一O7 基金项 目：贵州省社会发展公关项 目[黔科合 sz字2009—3022，2009—2011)]；贵阳市社会发展公关项 目[2009