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海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒
海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒
产品编号 产品名称 包装
RG016 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100次
产品简介：
? 碧云天生产的海肾萤 光素酶报告基因检测试剂盒(Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit) ，是一种以 肠腔素
(Coelenterazine)为底物来检测海肾萤光素酶(Renilla reniformis luciferase，简称renilla luciferase)活性的试剂盒。
? 海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD的蛋白，在氧气存在的条件下，可以催化Coelenterazine氧化成Coelenteramide。在
Coelenterazine氧化的过程中，会发出生物萤光(bioluminescence)。生物萤光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪
进行测定。本试剂盒的检测原理参考图1。
图1. 海肾萤光素酶的检测原理图。
? 通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系，可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或
5’启动子区克隆在luciferase的上游，或把3’-UTR区克隆在luciferase的下游等，构建成报告基因(reporter gene)质粒。然后转
染细胞，用适当药物等处理细胞后裂解细胞，测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因
的转录调控作用。海肾萤光素酶一方面常用作萤火虫萤光素酶报告基因检测的内参，以消除由于质粒的转染效率不同而带
来的误差；另一方面海肾萤光素酶也可以和萤火虫萤光素酶一样被用于常规的报告基因检测。
? 海肾萤光素酶催化Coelenterazine发光的最强发光波长为465nm (centered around 465nm)。
? 本试剂盒可以测定100个样品。
包装清单：
产品编号 产品名称 包装
RG016-1 海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液 60ml
RG016-2 海肾萤光素酶检测缓冲液 10ml
RG016-3 海肾萤光素酶检测底物(100×) 100μl
— 说明书 1份
保存条件：
海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液和海肾萤光素酶检测缓冲液，4oC 保存3个月有效，-20oC 保存一年有效；海肾萤光素酶检
测底物(100×)，-20oC 避光保存6个月有效，-80oC 避光保存一年有效。
注意事项：
? 为取得最佳测定效果，在用单管的化学发光仪测定时，样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同时间内，
例如30秒内；使用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好，然后统一加入海肾萤光素酶检测
工作液。
? 由于温度对酶反应有影响，所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。
? 样品和测定试剂混合后，必须等待1-2秒，再进行测定。测定时间通常为10秒，根据情况也可以测定更长或更短时间，但是
同一批样品宜使用相同的测定时间。
? 海肾萤光素酶检测底物(100×)配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于100μl的
情况，此时用无水乙醇把体积补足至100μl，并混匀后即可使用。
? 海肾萤光素酶检测工作液宜配制后立即使用。如不能立
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