蛋白质沉淀剂对棉铃虫谷胱甘肽！转移酶的部分纯化.PDFVIP

昆 虫 学 报 !#$ %#’(’)’*+$ ,++$，!#$% ’’(，)（* ）：+, - +,* .//0 ’)()1232 蛋白质沉淀剂对棉铃虫谷胱甘肽 !转移酶的部分纯化 汤 方，张常忠，梁 沛，史雪岩，高希武! （中国农业大学农学及生物技术学院昆虫学系，北京 +’’’3)） 摘要：通过用聚乙烯亚胺（J6.）、硫酸铵、聚乙二醇（J65）沉淀技术和 5/K1/D@8#?D )L 亲和柱对棉铃虫 -.)+’/.01$ $0(+*.0$ （KMN:D#）幼虫中谷胱甘肽 /1转移酶进行了部分纯化研究。结果表明 J65+’’’’ 和 J65’’’’ 的纯化效果优于硫酸铵的沉淀效 果。通过 J6. 沉淀去核酸后，再用硫酸铵沉淀，中肠和脂肪体 5/O 活性分布在 ,’P Q ,(P和 2’P Q 2(P沉淀段，比活力分别为 +’*+R)3 和 (32R)+ :7?%（S 7$:· 7;），纯化倍数分别为 R(4 和 R。在 2 种 J65 中，J65+’’’’ 和 J65’’’’ 的纯化效果较好。在中 肠和脂肪体中 J65+’’’’ 沉淀的 5/O 活性峰分别在 )’P Q )(P和 4’P Q )’P，5/O 比活力分别为 ,3(R++ 和 + ’*’R+* :7?%（S 7$:· 7;），纯化倍数分别是 R) 和 4R3,。J65’’’’ 沉淀中肠和脂肪体 5/O 的活性峰分别在 (P Q )’P 和 (P Q )(P，比活力分别 是 ,2,R(, 和 3)(R32 :7?%（S 7$:· 7;），纯化倍数分别是 R*+ 和 4R’(。用 5/K1/D@8#?D )L 纯化中肠 5/O，5/O 比活力达到( ***R)) :7?%（S 7$:· 7;），纯化倍数达到 +’,R4*。 关键词：棉铃虫；谷胱甘肽 /1转移酶；硫酸铵沉淀；聚乙烯亚胺沉淀；聚乙二醇沉淀；5/K1/D@8#?D )L 亲和柱 中图分类号：T32(R3 文献标识码：! 文章编号：’)()123（2 ’’(）’1’+,1’, #$%’$( )*%’+’,$’-. -+ /(*$0’-.1 !%$.2+1%$212 34 )%-1’. )%1,’)’$-%2 ’. 01 ,--. 3-((5-%6，!#$%’()* *(+$,(*（783.1%） O!05 U8:;，VK!05 W@8:;1V@?:;，X.!05 JD$，/K. YAD1Z8:，5![ Y$1\A!（]D8#97D:9 ? 6:9?7?%?;^，W?%%D;D ? !;#?:?7^ 8:E L$?9DC@:?%?;^，W@$:8 !;#$CA%9A#8% _:$ID#$9^，LD$‘$:; +’’’3)，W@$:8） 932%$,：O@D 8#9$8% A#$$C89$?: ? ;%A989@$?:D /19#8:D#8D（5/O）$: %8#I8D ? 9@D C?99?: N?%%G?#7，-.)+’/.01$ $0(+*.0$（KMN:D#）G8 9AE$DE A$:; 877?:$A7 A%89D #8C9$?:89$?: 89D# ?%^D9@^%D:D $7$:D（J6.）#8C9$?:89$?:， ?%^D9@^%D:D;%^C?%（J65）#8C9$?:89$?: 8:E 5/K1/D@8#?D )LB O@D #DA%9 @?GDE 9@89 D$C8C^ ? A#$$C89$?: N^ J65+’’’’ 8:E J65’’’’ G8 ND99D# 9@8: 9@89 ? 877?:$A7 A%89D #8C9$?:89$?: 89D# J6. #8C9$?:89$?:B !9D# G$$:; ? :AC%D$C 8C$E A$:; J6. #8C9$?:89$?:，9@D D8a ? 5/O 8C9$I$9$D GD#D $: ,’P - ,(P 8:E 2’P - 2(P ? 877?:$A7 A%89D #8C9$?:89$?: ?# 7$E;A9 8:E 89 N?E^，#DDC9$ID%^；9@D DC$$C 8C9$I$9$D GD#D +’*+