人β防御素2在肺癌组织中的表达水平及其临床的论文.docVIP

　　人β防御素2在肺癌组织中的表达水平及其临床的论文 【摘要】 目的 探讨人β防御素2(hbd2)在肺癌组织中的表达及其临床意义。 方法 收集32例不同类型肺癌的标本，每份标本取癌组织及癌旁正常组织。采用免疫组化及anufacturing developing rebinant cytokines，辣根酶标记兔抗山羊igg(h+l)购自北京中山生物技术有限公司。免疫组化试剂盒及其余试剂购自武汉凌飞公司。 1.2 病例和组织标本 病例和标本取自华中科技大学同济医学院附属同济医院胸外科2005年11月～2006年2月共32例肺癌标本（包括12例小细胞肺癌和20例非小细胞肺癌），每例标本切下后均立即收集癌组织及其周边正常肺组织（距肿瘤边缘gt;5cm，经病检证实）置于－75℃冰箱内保存，所有病例在术前均没有接受放化疗处理。 1． 3 方法 1．3．1 组织总蛋白的提取 参照lt;分子克隆实验指南gt;第3版，采用裂解缓冲液进行组织总蛋白的提取[4]。 1．3．2 蛋白浓度的测定 用pharmacia biotech 公司生产的ulterspec紫外/可见光分光光度仪进行直接蛋白浓度的测度。 1．3．3 l的浓度加入一抗（antihbd2、βactin抗体）37℃孵育2h，抗体洗脱液tbst洗3次，每次10min。按1∶500加入辣根酶标记兔抗山羊igg(h