子宫内膜异位症和子宫腺肌症脆性组氨酸三联体表达的意义的论文.docVIP

　　子宫内膜异位症和子宫腺肌症脆性组氨酸三联体表达的意义的论文 【摘要】 目的： 观察脆性组氨酸三联体(fhit)蛋白在子宫内膜异位症(em)和子宫腺肌症(am)中表达的作用. 方法： 应用免疫组化sp法检测36例子宫内膜异位症(em组)异位内膜、22例子宫腺肌症(am组)在位内膜及15例子宫肌瘤患者子宫内膜(对照组)中fhit蛋白的表达情况. 结果： fhit主要表达在腺体上皮细胞的胞质和胞膜；em组和am组的fhit表达无显著性差异，明显低于对照组；各组子宫内膜fhit表达在增生期和分泌期均无显著性差异(pgt;0.05)；em组在位内膜的fhit表达在临床rafs不同期别中无显著性差异(pgt;0.05)，但异位内膜的fhit表达在不同rafs分期中差异显著(plt;0.05)，fhit表达的阳性强度与rafs分期呈负相关(r=-0.40，plt;0.05). 结论： fhit可能在子宫内膜异位症的发生、发展过程中起重要作用. 【关键词】 子宫内膜异位症 子宫腺肌症 脆性组氨酸三联体 0引言 子宫内膜异位症(endometriosis, em)和子宫腺肌症(adenomyosis, am) 均是育龄妇女常见病，确切发病机制目前仍不清楚，该病在组织学上虽为良性，但其侵袭、种植的生物学行为与恶性肿瘤极其相似. 脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad, fhit)是一种抑癌基因［1］，主要通过参与细胞周期调控和凋亡发挥抑癌作用，目前有关该基因的研究多集中于肿瘤方面，而在子宫内膜异位症发病机制中的作用少见报道. 我们采用免疫组织化学法检测fhit蛋白在异位子宫内膜、在位子宫内膜和正常子宫内膜中的表达，探讨其在子宫内膜异位症发生、发展中的作用. 1材料和方法 1.1材料200609/200705在我院行手术治疗的子宫内膜异位症36例(em组)，取其异位内膜和在位内膜标本，其中增生期25例，分泌期11例；按rafs分期法，ⅰ~ⅱ期8例，ⅲ期17例，ⅳ期11例. 同期子宫腺肌症22例(am组)，亦取其异位内膜和在位内膜标本，其中增生期15例，分泌期7例. 同期单纯子宫肌瘤患者15例(对照组)，取其子宫内膜标本，其中增生期10例，分泌期5例. 所有患者年龄21~50（平均35.0±5.3)岁，术前半年均未使用激素类药物治疗或使用过宫内节育器(iud)，月经均规律，无不规则阴道流血. 所有诊断均经术后病理证实，内膜分期依据月经周期的时间结合he染色组织切片确定. 兔抗人fhit多克隆抗体、免疫组化sp试剂盒和dab显色剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司. 1.2方法标本经100 g/l甲醛固定，常规石蜡包埋，做5 μm厚连续切片，采用免疫组化sp法，fhit抗体的稀释浓度为1∶75，染色步骤严格按试剂盒要求进行，以磷酸盐缓冲液(pbs)代替一抗作为空白对照，以乳腺癌为阳性对照，dab显色剂显色. fhit蛋白阳性信号呈棕黄色或棕褐色，主要定位于胞质和胞膜. fhit阳性强度采用文献［2］综合评分法判定，先按染色深度评分：无色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分；再按阳性细胞所占百分比评分：阳性细胞lt;5%为0分，5%~25%为1分，25%~50%为2分，50%~75%为3分，gt;75%为4分；再计算染色深度与阳性细胞百分比的乘积用以表达阳性强度：9~12分为强阳性(++)，5~8分为弱阳性(+)，0~4分为阴性(-). 统计学处理：使用统计学软件spss13.0建立数据库，组间fhit阳性率的比较采用χ2检验和fisher确切概率法，阳性强度的比较采用秩和检验(an等级相关分析. plt;0.05为差异有统计学意义. 2结果 2.1各组子宫内膜fhit蛋白表达各组fhit主要表达在腺体上皮细胞的胞质和胞膜，在位内膜间质亦有表达，腺体fhit表达强于间质，异位内膜间质无表达. 正常内膜fhit表达阳性率为100%(15/15)；em和am在位内膜阳性率分别为86.1%(31/36)和86.4%(19/22)，二者间无显著性差异(pgt;0.05)，em和am在位内膜阳性率均低于正常内膜阳性率，但差异无统计学意义(pgt;0.05)；em和am异位内膜fhit表达阳性率分别为66.7%(24/36)和63.6%(14/22)，二者无显著性差异，但均明显低于正常内膜阳性率(χ2=4.82，p=0.03和p=0.01). 对照组子宫内膜gt;em/am组在位内膜gt;em/am组异位内膜(表1，图1). 各组子宫内膜的fhit蛋白表达阳性率和阳性强度在增生期与分泌期均无显著性差异(表1). 表1子宫内膜中fhit的表达情况 2.2fhit表达与rafs分期的关系em组在位内膜