血片制作及染色.pptVIP

*;血片制作所需设备;*;*;*;涂制血膜规则;*;*;厚血膜 用推片的一角，从取血部位刮取约4 -5微升血量（相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外一个方向旋转，转2~4圈，涂成直径0.8~1厘米大小圆形厚血膜 薄血膜再取一小滴血.将血置于离厚血膜适当的距离（0.5cm~0.7cm），将推片的边缘紧贴载玻片，轻轻上下移动，使血液沿边缘散开，然后匀速地向前推进，形成薄而平铺的薄血膜。;;*;标准的疟疾厚薄血膜片;*;*;*;*;血片的染色（一）染液的种类及染色原理;*;*;*;*;染色前薄血膜甲醇固定;厚血膜PBS或清水溶血;*;*;将已固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入2%吉氏染 液（98毫升的缓冲液或净水中加入2毫升吉氏染液原液，混匀）浸没血片，染色30分钟。然后用清水轻轻将染液漂洗干净，将染色片插于晾片板上晾干，包装，待镜检（如果染色效果不理想时，得酌情增减染色时??和浓度）。 ; 单片染色在量筒内先加入1-2mlPBS缓冲液或净水，然后加入吉氏染液原液1-2滴（或按要求滴加），混匀后，均匀覆盖在已充分干躁的厚薄血膜上，染色20-30min。清水缓缓冲洗，晾干（血膜面朝内、厚血膜方向朝下），等待镜检。 要点： 量筒内先加入PBS，再加入吉氏染液原液 稀释好的染色液必须在60分钟内用完，超时重新配制;染色质量标准 显微镜下：疟原虫核呈红色,