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人乳头瘤病毒（HPV）6,11荧光定量PCR检测试剂盒
人乳头瘤病毒(HPV)6,11 荧光定量 PCR 检测试剂盒
【前言】
本品采用聚合酶链式反应（PCR）结合 Taqman 荧光探针技术，对皮肤及粘膜上皮组织中的人乳头瘤
病毒(Human papillomavirus)6,11 型的特异性 DNA 核酸片段进行检测，从而判断人乳头瘤病毒 6,11 型核酸
的存在。试剂盒中使用 dUTP 和 UNG 酶防止扩增产物的污染。
【规格】
32 人份
【试剂盒组成】
1 HPV PCR 缓冲液 600μl 7 HPV 阳性校准品 1 号 30μl
2 Taq 酶 64μl 2×106copy/ml
3 DNA 提取液 2×0.8ml 8 HPV 阳性校准品 2 号 30μl
5
4 MgCl2 100μl 2×10 copy/ml
5 HPV 荧光探针 100μl 9 HPV 阳性校准品 3 号 30μl
6 阴性对照 100μl 2×104copy/ml
【适用仪器】
本试剂盒在样本处理时应使用符合生物安全规范的负压操作台,适用于 LightCycler、Rotor-Gene、
PE-5700 等基于 Taqman 技术原理设计的自动荧光 PCR 仪及相应软件。
【标本采集和处理】
尿道、阴道、宫颈分泌物：分泌物棉拭子放入有 1ml 注射用生理盐水的 1.5ml 离心管中，充分洗涤后挤干，
弃去棉球，将浸出液 12,000rpm 离心 15 分钟，弃上清。在沉淀中加入 50ulDNA 提取液，吹打均匀后 100℃沸水浴
15 分钟，12,000rpm 离心 10 分钟。
【试剂准备、加样和 PCR 扩增】
1、 试剂准备：按样品数n 取 HPV PCR缓冲液 (n+1)×18ul、MgCl2 (n+1)×3ul、HPV荧光探针(n+1)×3ul、Taq
酶(n+1)×2ul混于一离心管中，旋涡振荡器上振荡混匀 10 秒，低速离心数秒，按每管 26ul分装。
2、 加样：将样品处理上清液（冻存样品使用前室温充分融化，振荡混匀数秒，13,000rpm 离心 2 分钟）和定量
校准品（使用前应先离心，再充分振荡混匀）1－3 号各 4ul 分别加入反应管中，混匀后置于自动荧光 PCR
仪上，立即进行 PCR 扩增反应。（LightCycler 仪器：反应液配好后，分别取 20ul 移入专用毛细管中，低速离
心数秒后置入 LightCycler－注意事项
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