新生儿CYP1A1、GSTM1、GSTT1基因的多态性调查的论文.docVIP

　　新生儿CYP1A1、GSTM1、GSTT1基因的多态性调查的论文 　　【摘要】 目的 研究新生儿cyp1a1、gstm1、gstt1基因的多态性分布，为新生儿建立相应基因型记录，达到防病治病的目的。方法 收集新生儿脐血，抽提其中有核细胞的dna，pcr扩增cyp1a1、gstm1、gstt1基因的特征性外显子片段。限制酶切cyp1a1扩增产物，rflp分析每个标本的基因型；非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析gstm1、gstt1的基因型。结果 cyp1a1、gstm1和gstt1基因型均呈多态性分布，cyp1a1的基因型分布有3种，分别为a/a基因型（占60.9%）、a/g基因型（占34.5%）、g/g基因型（占4.5%）；gstm1的基因型有2种分别为gstm1+/+和gstm1 +/0（占85.5%）、gstm10/0（占14.5%）；gstt1基因型分布为gstt1+/+和gstt1 +/0（占76.4%），gstt1 0/0（占23.6%）。结论 在正常出生的新生儿中，代谢酶cyp1a1、gstm1、gstt1基因存在着多态性分布的现象。 　　【关键词】 婴儿，新生；细胞色素p450；谷胱甘肽-s-转移酶；基因 　　distribution of polymorphism of infant cyp1a1，gstm1 and gstt1 genotypes 　　zhou yi,xiong mi,ma zhiming,et al. 　　tongji medical college,huazhong university of science and technology,orphism of infant cyp1a1,gstm1 and gstt1 genotype.methods the dna ne1 gene,specific region of gstt1 gene and exon 7 of cyp1a1 gene plified by pcr,the polymorphism of cyp1a1 gene orphism of gstm1 and gstt1 gene 1,gstt1 orphic distribution in infants.there 1 1+/+(including gstm1 +/0)and gstm1 0/0 based on the amplified alleles deleted or not,their ratio orphic distribution of infant metabolic enzyme cyp1a1,gstm1,gstt1.it indicates that the varability of suffering disease may be among the individuals. 　　【key e p450;glutathione stransferases;gene polymorphism 　　人类的许多疾病都与其自身的遗传因素有关，如视网膜母细胞瘤、家族性结肠息肉病等；甚至某些恶性肿瘤的发生也有遗传性的易感倾向［1～8］。.已有研究证实，肺癌、肝癌、慢性阻塞性肺疾病等多种疾病与代谢酶细胞色素p450（cytochrome p450,cyp450）和谷胱甘肽s转移酶（glutathione stransferase,gst）的多态性有关［4～6］。新生儿的遗传物质受外界影响最小，基因突变的几率最小，能比较全面地反映其基因型概况。本实验用新生儿脐血中有核细胞的基因组dna，通过pcr扩增cyp1a1、gstt1、gstm1的基因片段，限制性片段长度多态性（restrict fragment length polymorphism,rflp）分析cyp1a1基因，非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析gstt1、gstm1的基因片段多态性，为新生儿建立基因档案，进一步指导他们在以后生活中有目的地进行防病治病。 　　1 材料与方法 　　1.1 仪器与试剂 一次性负压自动抽血试管（武汉致远医疗器械设备有限公司），低温离心机（sigma公司）。ptc―100型程控热循环仪（美国），超声波细胞破碎仪（美国），震荡器，恒温摇床，低温冰箱，恒压电泳仪，垂直电泳槽，edta，triscl，平衡酚，异戊醇，三氯甲烷，十二烷基磺酸钠（sds），无水乙醇；pcr扩增缓冲液（内含15mmol/l mgcl2），taq热聚合酶，四种寡核苷酸混合物（每种浓度均为1mmol/l），扩增基因片段的引物，限制性内切酶ncol及其酶切缓冲液。dna片段大小的标准参照物dna marker pbr3220dna/haeⅲ、pbr322dna/mspⅰ（华美生物工程公司）。pcr扩增