浅蓝菌素脂质体的制备及其对肿瘤细胞体外增殖影响的研究的论文.docVIP

　　浅蓝菌素脂质体的制备及其对肿瘤细胞体外增殖影响的研究的论文 【摘要】 　　目的 制备浅蓝菌素脂质体并研究其对her2/neu(erbb2)原癌基因过表达肿瘤细胞株体外增殖的影响。方法 采用超声薄膜分散法制备浅蓝菌素脂质体；正交设计优化处方；hplc法测定药物包封率及脂质体中药物浓度；离心加速实验及冷藏实验考察脂质体稳定性；活细胞计数法测定细胞生长曲线；mtt法测定游离浅蓝菌素及浅蓝菌素脂质体对细胞的增殖抑制作用。结果 浅蓝菌素脂质体的平均粒径为134.3 nm，稳定性良好，最佳处方条件下药物包封率为(53.45±3.67)%，脂质体中药物质量浓度为(1.126±0.065) mg/ml，剂量依赖性抑制skbr3和skov3细胞的增殖，ic50分别为9.62和9.32 μmol·l-1。结论 该制备工艺和处方可行，所制备的浅蓝菌素脂质体对skbr3细胞和skov3细胞有明显的增殖抑制作用，且作用强于游离浅蓝菌素。 【关键词】 浅蓝菌素 脂质体 包封率 肿瘤细胞 ic50 　　abstract:objective to optimize the preparation of cerulenin iposomes and investigate the effect of cerulenin liposomes on proliferation of tumor cells overexpressing her2/neu in vitro. methods cerulenin embedded in liposomes bedding rate of cerulenin es es ent and deep freezing. the groes at different concentrations ined by counting the cell number and ic50 of cerulenin liposomes ined by mtt method. results the average diameter of cerulenin liposomes bedding rate of cerulenin into liposomes es g/ml. the liposomes inhibited the groanner and the ic50 of cerulenin liposomes on skbr3 and skov3 cells ol/l respectively. conclusion the cerulenin liposomes that odified formulation inhibited the proliferation of skbr3 and skov3 cells in vitro es; embedding rate; tumor cells; ic50 　　近年来研究发现脂肪酸合成酶(fas)在多种恶性肿瘤如乳腺癌、卵巢癌中呈高表达，并且与肿瘤的恶性程度及预后相关［1，2］。.fas的抑制剂浅蓝菌素通过与脂肪酸合成酶复合体系的β酮脂酰acp合酶末端丝氨酸的sh结合，形成内酰胺从而使fas失活，但只有her2/neu(erbb2)原癌基因过表达的肿瘤细胞株才对浅蓝菌素敏感［1］。 　　 　　浅蓝菌素(cerulenin, ce)为浅蓝头孢霉菌的次级代谢产物，研究发现其也可从多种微生物及动物组织中分离提取［3］。除了用于治疗肥胖症外，近几年还发现浅蓝菌素具有抗真菌［4］、抗病毒［5］、抗癌［6］等药理作用，引起了研究者的极大兴趣。但该化合物水溶性差（溶解度约为0.3 mg/ml）、毒副作用较强，且化学性质不稳定。研究表明，脂质体作为药物载体可以有效地降低毒副作用，且免疫脂质体可以将药物靶向释放到靶分子［7］。本研究制备了浅蓝菌素脂质体(cel)，对其稳定性进行考察；并以her2/neu(erb b2)过表达的肿瘤细胞株skbr3和skov3为实验对象，考察cel对细胞体外增殖的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 仪器与试剂 　　shimadzu lc10atvp高效液相色谱仪(日本岛津)； c18 ods分析柱(diamonsiltm, 5 μm, 150 mm×4.6 mm，北京迪马科技有限公司)；revco 3000 细胞培养箱(美国revco公司)；model 312分光光度平板读数计(biotech research laboratories inc.)；re52旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；bi90型激光粒度分析仪(brookheven co., usa)；sigma 3k18低温高速离心机（德国sig