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一节 克隆载体
第一节 克隆载体;噬菌体简介;
噬菌体或病毒的DNA能被开发成为基因工程的有用载体，因为：
1.高效率的感染性能使外源基因高效导入受体细胞；
2.自主复制繁殖性能使外源基因在受体细胞中高效扩增。 ; 大肠杆菌的λ-噬菌体;48.5kb;λ噬菌体基因大致分为3个区： ;;3、感染周期（溶菌循环）; 头部包装蛋白首先结合在cos区的附近，形成包装启动复合物，A蛋白切割cos位点。;4、溶源状态的建立;噬菌体基因组可以整合到大肠杆菌染色体DNA上，成为原噬菌体。
适当条件下，原噬菌体又可以脱离寄主染色体，重新变成独立的复制子，这种过程叫做原噬菌体的删除作用。
;噬菌体的溶源和裂解; λ-DNA载体的构建;
;插入型载体、取代型载体 ;插入型载体（insertion vector）;取代型载体（substitution vector）;插入型载体只能承受较小分子量（一般在10kb以内）的外源DNA片段的插入，广泛应用于cDNA及小片段DNA的克隆。
; 删除重复的酶切位点:野生型λDNA链上有
5个EcoRI位点和7个HindIII位点，不利于重
组操作，必须删除至1-2个.
为了便于各种来源的DNA片段的克隆，还
需要增加一些单一的酶切位点.
;3、灭活某些与裂解周期有关的基因;4、加装选择标记;(1)免疫功能失活标记 (cI筛选);(2)加装选择标记lacZ（蓝白斑筛选）;5、建立?-噬菌体的体外包装系统;;（三）λ-DNA作为载体的优点
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