细胞性心肌成形术对受损心肌的治疗潜能的论文.docVIP

　　细胞性心肌成形术对受损心肌的治疗潜能的论文 【摘要】 概述干细胞移植治疗受损心肌的研究进展，着重阐述骨髓来源的三种干细胞系移植的现状以及干细胞移植的优缺点、移植方式及待解决的问题。 【关键词】 干细胞 细胞移植 心肌梗塞 　　长期以来研究者认为成年心肌细胞是有丝分裂终末期细胞，当心肌受到缺血、炎症等损伤或先天畸形时，虽然采取先进的手术方式、系统的药物治疗和器官移植，受损心肌细胞亦不能再生。但是近几年的研究表明成熟心脏存在极少量的干细胞或前体细胞，这些细胞在心脏中形成储备，并在一定条件下分化成心肌细胞。尽管如此，储备的干细胞或前体细胞来源未明，而且极少量的新生细胞不能有效的地修复受损心肌[1]。 　　细胞性心肌成形术（cellular cardiomyoplasty）,即将未成熟细胞移植并修复受损心肌，已成为近几年研究的新兴领域[2]。 　　1 移植细胞的类型及相关研究 　　干细胞(stem cell,sc)是具有自我复制和多向分化潜能的细胞,既能产生表现型和基因型与自己完全相同的子代干细胞,也能在一定条件下分化为各种功能细胞。目前的研究中涉及了多种干细胞的移植。. 　　1.1 胚胎干细胞(embryonic stem cell,esc) 　　esc来源于4～5 d胚胎内细胞团（胚泡）或原始生殖细胞，经过体外分化抑制培养和传代后筛选出的具有全能性的细胞。当在适合的培养基和培养条件下，esc可以无限增殖和保留分化成所有类型细胞的能力，包括心肌细胞[2]。 　　在体外，kehat等[3]将人esc成功诱导分化成可自发收缩的心肌样细胞，收缩时间最长可持续5周。这些细胞有肌纤维样超微结构，能表达肌球蛋白重链（mhc）α肌动蛋白、支架蛋白、心肌肌钙蛋白及心房利钠肽（anp）等人类心肌特异性标志物。min等[4]将培养的esc经绿荧光蛋白（gfp）标记转染后注入小鼠心肌梗死模型，6周后发现移植组心功能明显好于对照组，移植细胞在移植组梗塞区心肌中存活和分化并表达α-肌动蛋白、肌球蛋白重链和肌钙蛋白。另一项研究更是发现esc来源的心肌样细胞与心肌细胞之间可形成功能性的缝隙连接（gj），对钙离子产生敏感性收缩;单个新生成的心肌样细胞也具有兴奋－收缩偶联的性质[5]。目前esc移植还不提倡用于临床，原因有：（1）需要免疫抑制剂抑制移植后产生的排斥反应；（2）移植后有形成畸胎瘤的可能；（3）涉及道德、伦理等诸多存在争议的问题[2]。 　　1.2 骨髓来源的干细胞 　　骨髓含有三种干细胞系：造血干细胞（hsc）、内皮祖细胞（epc）和骨髓间充质干细胞（mscs）。hsc具有全血细胞系的再生能力；epc与血管的发生和重建有关；mscs则是20世纪70年代以来发现的骨髓中一小部分具有多向分化潜能的细胞。尽管目前采用了贴壁分离法、密度梯度离心法及流式细胞仪等多种方法，但如何在骨髓中将三种干细胞高纯度分离的问题至今还未完全解决。 　　1.2.1 hsc：hsc为骨髓中含量最多的干细胞系，但数量稀少,大约104到105个骨髓细胞中含有1个hsc。尽管如此，1到50个hsc便可重建整个淋巴造血系统[6]。它还能自我更新，分化成多种类的特化细胞，特定条件下动员至外周血[2]。在肿瘤、造血系统和免疫系统障碍中，hsc移植已成为一种成熟的治疗手段。 　　orlic等[7]研究中将富含hsc(lin-c-kit+)的成体骨髓细胞群直接注射到心肌梗死的8周龄雌性鼠（c57bl/6）的梗塞区中，发现广泛的心肌再生。同时他们还通过生长因子（gf）动员骨髓细胞入外周血的方法在8周龄雄性鼠（c57bl/6）心梗模型中观察到类似的结果。oto 等[16]在外周血中收集epc并移植到猪心肌缺血模型中，发现移植细胞可以提高左心室血流灌注和运动功能。massa等[17]证明在急性心肌梗死（ami）的病人epc可以被动员至外周血和心脏中并形成新生血管。该实验提示了梗塞心脏区释放入外周血的炎症细胞因子可以触发循环中的骨髓干细胞分化成为特定功能的细胞系。此外，若干小规模的临床实验也取得了令人鼓舞的结果。ami患者祖细胞移植增强再生研究（topcare-ami）实验中，20例ami后4 d再灌注的病人接受了骨髓或外周血来源的epc的移植，结果显示4月后的lvef和缺血区室壁运动显著提高，同时心室收缩末径减小[18]。 　　1.2.3 mscs：mscs存在于出生后和成年的骨髓腔。它们通过表达多种细胞因子、生长因子及粘附分子等支持骨髓造血。有证据表明，mscs的数量随着年龄的增长而逐渐减少，如在骨髓细胞的比值中从新生儿的1/104减少到80岁的1/2×106 [19]。另外，在体外经5-氮杂胞苷（5-aza）可诱导动物和成人的mscs成心肌样细胞。人mscs还具有