第三章+基因突变案例.pptVIP

第三章 工业微生物诱变育种;一、基因突变的分类;基因突变的规律; ;（一）突变类型 ●营养缺陷型：野生型菌株由于突变而丧失 了 某种营养合成能力，而无法在基本培 养基上生长的变异类型。 表示： 基 因：his+，his - ； 表 型：His + ，His -; ●抗性突变型： 野生型菌株由于突变而产了对某些化学药物或致死物理因子抗性变异类型。 表示： 基 因： strr、strs； tetr、tets； 表 型：Str r ， Str s; ●条件致死突变型： 某些菌株或病毒经基因突变后，在某种条件可生长并实现表型，而在另一条件却无法生长繁殖的突变类型。 (如温度敏感突变株：Ts） ●形态突变株 ●抗原突变株 ●产量突变株;●突变株类型划分： ----选择性突变株：营养缺陷型、抗性 突变型、条件致死突变型 ----非选择突变株：形态、抗原、产量 突变型;四、基因符号表示;3.突变位点应通过在突变基因符号后加不同数字表示。如supE44 4.某个基因或某个领域缺失时，在其基因型前面加上“?　”表示。例如：lac-proAB 基因缺 失时它的基因型表示为?(lac-proAB)。 5. Φ 融合 如Φ（ara-lac）表示ara和 lac融合成新基因 ;（二）突变率及其捡出 ●突变率： 某一细胞在每一世代中发生突变的几率。常用单位群体中每一世代产生的突变株的数目来表示。;一个细菌分裂一次产生两个细菌，两个细菌再经一次分裂产生四个细菌，这时一个细菌开始总共经历了三个世代。细菌繁殖过程中的世代总数为细菌数减1.如果细菌总数和开始时的细菌总数相差很大，可以认为细菌总数就是世代数。 突变率＝（M2-M1）/(N2-N1)，其中M为抗性菌落数；N为不同时间的细菌数。;●突变株的捡出及突变率的计算 ;突变的特点;突变热点产生的原因;第二节 诱变剂与突变机制;碱基置换可以分为两类：转换和颠换前者是嘌呤到嘌呤，嘧啶到嘧啶的变化，后者是嘌呤到嘧啶或嘧啶到嘌呤的变化。;碱基置换的诱变原理;碱基类似物——5BrU的诱变机理和该假设的证明;;Deamination of bases;Nitrous acid;is specific for cytosine, but only works in vitro (cannot enter cells).;Alkylating agents are excellent donors of alkyl groups.;EMS and MMS tend to ethylate (or methylate) N7 of guanine or N3 of adenine,which severely disrupts base pairing:;是一种诱变作用特别强的诱变剂。可以使一个群体的任何一个基因的突变率高达1%。此外可以诱发邻近的位置的基因同时发生突变，即引起多位点的突变。;烷化剂对DNA的损伤;d.交联：烷化剂有两类，一类是单功能基烷化剂，如甲基甲烷碘酸，只能使一个位点烷基化；另一类是以双功能基烷化剂，化学武器如氮芥、硫芥等，一些抗癌药物如环磷酰胺、苯丁酸氮芥、丝裂霉素等，某些致癌物如二乙基亚硝胺等均属此类，其两个功能基可同时使两处烷基化，结果就能造成DNA链内、DNA链间，以及DNA与蛋白质间的交联。;移码突变;;;;;; 有效诱变范围：200～300nm;UV照射形成嘧啶二聚体;电离辐射引起的DNA损伤;电离辐射可导致： 　　a.碱基变化　主要是由OH－自由基引起，包括DNA链上的碱基氧化修饰、过氧化物的形成、碱基环的破坏和脱落等。一般嘧啶比嘌呤更敏感。 　　b.脱氧核糖变化　脱氧核糖上的每个碳原子和羟基上的氢都能与OH－反应，导致脱氧核糖分解，最后会引起DNA链断裂。 　　c.DNA链断裂　这是电离辐射引起的严重损伤事件，断链数随照射剂量而增加 d.交联　包括DNA链交联和DNA-蛋白质交联。 ;激光诱变;Mutagen;第三节 突变体的形成;第四节 DNA损伤的修复; 光复活作用 切除修复 重组修复 DNA聚合酶的校读作用 SOS修复 适应性修复;1.光复活修复;photolyase; 修复DNA损伤最为普遍的方式，对多种DNA损伤包括碱基脱落形成的无碱基位点、嘧啶二聚体、碱基烷基化、单链断裂等都能起修复作用。 这种修复方式普遍存在于各种生物细胞中，也是人体细胞主要的DNA修复机制。 主要有两种形式;为普遍的无差