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实验二、聚聚酶式合酶链式反应 （PlPolymerase Ch Chiain R eac tion, PCR ） 黄立华 副教授、硕导 huanglh@ .cn 黄群声 高级实验师 实验目的及要求 掌握： ? 技术原理 ? PCR扩增技术的原理 ? 技术操作 ? 微量移液器的使用方法 ? PCR体系建立的基本操作 本次课堂内容 ? 第一部分：PCR操作 ? 第二部分：PCR原理 实验材料与试剂 1、DNA模板(template)： λ 噬菌体的质粒DNA 2、dNTP: 4种dNTP混和物 3、10× PCR缓冲液(buffer): 组分如下: 15mmol/L MgCl2 500mmol/LKCl 100mmol/L Tris.HCl (pH8.3) 0.1%明胶 4、引物(primer): 上游引物（M13 F），下游引物（M13 R）（见“实验指导”） 6、Taq DNA聚合酶 (Taq polymerase) PCR的基本步骤 1、PCR反应体系的建立 取0.2ml??薄壁离心管，按表1顺序