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出、凝血时间检验方法操作规程 　　一、停止使用出血时间测定项目的Duke法，但出血时间的检验项目不废除。若临床怀疑血管壁异常所致出血性疾病时（如血管性血友病、单纯性紫癜、过敏性紫癜等），可使用出血时间测定器法检测出血时间。 　　二、停止使用凝血时间测定玻片法和毛细血管法，用活化部分凝血活酶时间（APTT）或全血凝固时间（CT，试管法）测定进行替代。 　　三、停止使用一般外科手术前的常规出血时间检测，用活化部分凝血活酶时间（APTT）、血浆凝血酶原时间（PT）和血小板计数（PLT）联合检测取代，如临床有出血史时另加出血时间测定器法进行出血时间检测。 　　请将以上要求及时通知到各级各类医疗机构。在实施过程中，有条件的医疗机构要尽快达到上述要求。条件尚不具备的，必须在2001年12月31日前达到要求。 　　附件： 关于卫生部出凝血时间操作规程《通知》的理解 解放军总医院临床检验科丛玉隆 　　为了标准化出血与血栓性疾病检测，特别是解决手术前有关病人出血倾向筛查问题，卫生部颁发了（2000）412号文件，即《出血时间、凝血时间检验方法操作规程的通知》（以下简称通知）。以下是我们对文件的理解和体会。 一、《通知》主要内容 　　1.停止使用测定出血时间项目中的Duke法，但出血时间的检验项目不废除。若临床怀疑血管壁异常所致出血性疾病时（如血管性血友病、单纯性紫癜、过敏性紫癜等），可使用出血时间测定器法检测出血时间。 　　2.停止使用测定凝血时间的玻片法和毛细管法，用活化部分凝血活酶时间（APTT）或全血凝固时间（CT，试管法）测定进行替代。 　　3.停止使用一般外科手术前的常规出血时间检测，用APTT、血浆凝血酶原时间（PT）、和血小板计数（PLT）联合检测取代，如临床有出血史时另加出血时间测定器法进行出血时间检测。 二、出血时间测定及临床意义 　　从破裂或损伤的血管中，血液自行流出至血小板栓子形成暂时止血称为止血过程，许多病理因素可影响这一过程而导致出血不止。为此设计了许多试验寻找这一病理生理的原因，比如：内皮素测定，血管性血友病因子（vWF）测定，血小板聚集试验等等。这些试验灵敏，但操作复杂，常先用出血时间检验作为筛选试验，如为阳性结果，再做上述试验。 　　出血时间测定有三种方法，即Duke法、Ivy法、出血时间测定器法。Duke法虽操作简单，但穿刺深度、宽度难以标准化，且受穿刺部位毛细血管分布及血管收缩程度的影响，致使实验的敏感性很差。文献记载，血小板低于3×109/L的患者阳性率仅为42%，遗传性假血友病（VWD）患者阳性率为32%，而测定器法分别为92%和67%。Ivy法虽较Duke法敏感，操作繁琐，又是损伤性的，切口难以标准化，也不易住推广。出血时间沉定器法由于刀片埋装在仪器内部，由弹簧快速弹出，使切口深度、宽度易于控制，可标准化且灵敏度高。 　　因此，文件中规定出血时间测定实验应使用出血时间测定器法而废除Duke法。 三、凝血时间测定及临床意义 　　凝血时间试验是指血液自血管抽出放入试管中，从液态的溶胶状态为半固体凝胶状态所需要的时间。实际上是反映血液（或血浆）的Ⅻ因子被激活后，血浆中处于酶原状态的凝血因子依次被激活，连续“放大”，最终使纤维蛋白原变成纤维蛋白。后者形成网状结构网络血小板栓子和红细胞，最后网状纤维蛋白收缩，形成牢固的血块。这一过程需要Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ、Ⅹ、Ⅴ、Ca2+、凝血酶原及纤维蛋白原等诸凝血因子的参与，其中任一因子缺乏均可引起上述“连续放大”过程障碍，而使凝血不良。因此，凝血时间延长，可反映上述因子缺乏。虽其记录的是整个凝血过程，但此实验对Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ因子较为敏感，而只有凝血酶原、X因子、纤维蛋白原明显减低时才显示实验结果延长。 　　凝血时间实验大致有6种测定方法，王鸿利等用6种凝血时间测定对12例重型血友病（Ⅷ因子活性1%）、4例中型血友病（Ⅷ因子活性1%-5%）进行测定，结果（检出率/病例数）为：毛细血管法，重型1/12，中型0/4；玻片法，重型2/12，中型0/4；普通试管法，重型12/12，中型2/4；APTT，重型12/12、中型4/4；硅化管，重型12/12，中型4/4；ACT法，重型12/12，中型4/4。可以看出毛细血管法、玻片法很不敏感，不能再用于Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ因子的筛选实验。普通试管法简单且较敏感，标本用量较少，可用于常规检查，但由于是手工操作，要注意实验器材的标准化。APTT简便、快速，市场有各型凝血仪可用于不同规模实验室，且有配套的试剂、质控物、校准物、易于质量控制，是较理想的常规实验方法。APTT也可手工法，但影响因素较多，在标本量较多时，不适使用。 四、为什么手术前APTT、PT和血小板计数三项目检查作为出血倾向的诊断指标 　　为了避免术中出血，手术前进行出血倾向的检查非常必要，由于