狂犬病病毒抗体胶体金检测试纸的制备.PDFVIP

生物工程学报 Chin J Biotech 2011, May 25; 27(5): 799?804 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@ ?2011 CJB, All rights reserved. 研究报告 狂犬病病毒抗体胶体金检测试纸的制备 王铁成 1，张涛 2，杨松涛 1，王化磊 3，高玉伟 1，孙玮 3，靳晓霞 1，赵平森 2，冯娜 1， 黄耕 1，邹啸环 1，夏咸柱 1 1 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所 吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室，长春 130122 2 中国医学科学院 北京协和医院实验动物研究所，北京 100021 3 吉林大学 畜牧兽医学院，长春 130062 摘 要: 通过胶体金免疫层析技术建立一种特异、便捷、快速的狂犬病病毒抗体检测方法，对犬等动物免疫狂犬病疫 苗后的抗体水平监测提供参考。用醋酸锌沉淀法沉淀狂犬病病毒 CVS11，Sepharose 4FF 进行层析纯化。用柠檬酸三钠 还原法制备的胶体金，标记纯化的狂犬病病毒，喷于试纸的结合释放垫 (金标垫)，将 SPA (葡萄球菌表面 A 蛋白) 和纯 化的兔抗狂犬病病毒 IgG 分别喷于试纸的 T (检测线) 处和 C (对照线) 处，组装试纸条。用制备的试纸条对 261 份犬血清 进行检测，与快速荧光灶抑制试验 (RFFIT) 检测的结果一致；对已知效价的犬狂犬病毒中和抗体 (VNA) 大于 0.5 IU， 结果为阳性；对狂犬病病毒中和抗体 (VNA) 小于 0.5 IU/mL 的血清，结果为阴性。制备的狂犬病病毒抗体胶体金检测 试纸检测犬血清抗体，具有特异、便捷、快速的特点，能够检测出狂犬病病毒中和抗体大于 0.5 IU 的血清，适用于临 床犬血清抗体水平监测，具有良好的应用前景。 关键词: 胶体金，狂犬病病毒，中和抗体，CVS11 Preparation and application of a colloidal gold strip to detect the rabies antibody Tiecheng Wang1, Tao Zhang2, Songtao Yang1, Hualei Wang3, Yuwei Gao1, Wei Sun3, Xiaoxia Jin1, Pingsen Zhao2, Na Feng1, Geng Huang1, Xiaohuan Zou1, and Xianzhu Xia1 1 Key Laboratory of Jilin Provice for Zoonosis Prevention and Control, Institute of Military Veterinary, Academy of Military Medical Science,