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比色法和分光光度法
一. 概述
(1) 比色法和可见分光光度法的特点
比色法: 在分析化学中, 利用比较
有色溶液颜色的深浅来测定物质含
量的分析方法称为比色法。过去大
多用眼睛观察比较, 故又称目视比
色法。 ;光电比色法(分光光度法):
随着近代分析仪器的发展, 目前已
普遍使用光电比色计(分光光度计)通
过测量有色溶液对入色光的吸收程度
对物质进行分析, 称为光电比色法(分
光光度法)。;与目视比色法相比, 光度法的特点:
① 灵敏度高;10-5 ~ 10-6mol/L
② 准确度较高;
③ 仪器设备较简单, 操作简便、
快速;
④ 应用广泛。;(2) 光的性质和物质的颜色
光的性质: 光是一种电磁波, 具
有波粒二象性。光的波动性可用波长来描述, 其单位常用纳米(nm)表示, 波长越短, 能量越高。; 具有同一波长的光称为单色光,由不
同波长光组成的光称为复???光。; 互补色光: 若将两种颜色的光按适当的
强度比混合可成白光, 那么这两种光称为
互补色光。;物质的颜色:
物质对光的吸收是具有选择性的。
当一束白光通过溶液时, 若溶液对各
种色光都不吸收, 则白光全部通过,
溶液呈无色透明; 若各种色光几乎全
被吸收, 则溶液呈黑色; 若溶液只吸收
某种色光, 则溶液呈透过光的颜色, 也
就是说, 溶液呈吸收光的互补色光的
颜色。; 例如, 白光通过CuSO4溶液时, 溶液
颜色为蓝色。; 吸收曲线: 为了精确表明溶液对不
同波长光的吸收情况, 可将不同波长
的单色光依次通过某一固定浓度的有
色溶液, 测量该溶液对各单色光的吸
收程度, 即吸光度, 以波长为横坐标,
吸光度为纵坐标作图所得曲线, 即为
吸收曲线, 或称吸收光谱。;;二、朗伯-比尔定律
(1) 朗伯-比尔定律 ; 此式表明: 当一束平行的单色光通
过吸光物质的均匀溶液时, 溶液的吸
光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成
正比。
K:比例常数, 与入射光波长, 溶液
中吸光物质的本性及溶液的温度有
关。;(2) 吸光系数
当b以cm, c以g/L为单位, K为吸光
系数, 用符号a表示, 单位为L/g · cm
A=abc
当b以cm, c以mol/L为单位时, K为
摩尔吸光系数, 用符号ε表示, 单位
为L/ mol · cm
A=εbc
a与ε的关系: ; 比吸光系数( ): 指质量浓度
为 1%(g/mL), b为1cm时的吸光度
值, 单位为mL/g · cm
同一物质的ε与 之间的关系:; 例1 一含Fe2+浓度为0.5mg/L的溶
液, 用邻二氮菲显色测定, 吸收池厚
度为2cm,在508nm处测得吸光度为
0.19, 求其摩尔吸光系数和比吸光系
数。;;(3) 偏离朗伯-比尔定律的原因
标准曲线: 根据朗伯-比尔定律,当
吸收池厚度不变, 以吸光度为纵坐
标, 浓度为横坐标作图时, 应得到一
条通过原点的直线, 称为校正曲线或
标准曲线。;偏离朗伯-比尔定律的主要原因:
① 定律仅适用于稀溶液
② 化学变化引起的偏离(正偏离)
③ 非单色入射光引起的偏离(负
偏离);;三. 方法和仪器
(1) 目视比色法
目视比色法:
用眼睛观察比较溶液颜色深
度以测量物质含量的分析方法称
为目视比色法。;标准系列法的原理:;标准系列法的优点:
① 仪器简单, 操作简便,适宜于大批
试样分析
② 适宜于稀溶液中微量组分的测定
③ 某些不完全符合朗伯-比尔定律
的显色反应, 仍可用此法进行测
定。
标准系列法的缺点: 准确度较差。;(2) 光电比色法和可见分光光度法
① 光电比色法的原理: 所用仪器为光电比色计。
光源→滤光片→一定波长范围的近似单色光→有色溶液→透过光→光电池→检流计的标盘; 可见分光光度法所用的仪器称为
分光光度计, 它是利用分光能力很强的
棱镜或光栅的原理, 作为单色器, 可连
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