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生物标志物与分子流行病学;学习目标;操作目标;什么是生物标志物;为什么要用生物标志物;从暴露到发病的途径;生物标志物的分类;内部剂量标志物;生物学有效剂量标志物;易感性标志物;生物学反应标志物;疾病标志物;流行病学研究中常用的几种生物标志物;暴露剂量生物学标志物的用途;易感性生物学标志物的用途;早期生物学反应和疾病生物标志物的用途;例1、用TNT-Hb加合物估计TNT的暴露剂量;TNT从各种途径吸收进入血液以后，部分与血红蛋白结合，形成TNT-Hb加合物 TNT-Hb加合物与传统的暴露剂量指标、工种、TNT晶状体白内障有无等相关，表明这加合物能够真实反映暴露水平 TNT-Hb加合物相对稳定(3个月内) TNT-Hb反映了多途径总的暴露剂量;例2、黄曲霉毒素与肝癌关系研究;队列内病例对照研究：18,000份45-64岁健康男性尿液标本，随访7年，50人发生肝癌。 尿中黄曲霉毒素阳性发生肝癌的危险度RR为3，乙肝表面抗原阳性的危险度RR为7，两者均阳性的危险度为60。可见两种危险因素的作用间有相乘作用。;生物标志物的选择;应用生物学标志物应注意的问题;流行病学研究设计特点;应用生物学标志物的优点;应用生物学标志物的缺点;生物标志物 小结;分子流行病学;传统流行病学与分子流行病学;分子流行病学的切入点;生物标志物的种类;如何进行工作？;3、检测技术要合适。 （1） DNA水平：PCR、SSCP、测序 （2）RNA水平：RT-PCR、Northern Blot （3）蛋白质水平：Western Blot、组化 （4）功能水平：酶学、机能学;4、设计方案的要求： （1）与流行病学研究方法一致。 （2）样本种类和样本量的确定。 （3）检测指标的选择：要有理论依据； 考虑到纵向和横向对比。 （4）强调多学科的合作。;分子流行病学主要研究方法;二、标本收集与储存 建立与检测技术相适应的生物标本库。 要求:（1）.无污染。 （2）.每个标本都有标识和病例背景。 （3）.储存标本在有效期内结果稳定。;三、常用分子生物学及相关技术 简介 1、DNA: Southern blot; PCR; Sequencing. Enzyme restriction; electrophoresis. 2、RNA: Northern blot; Dot blot; RT-PCR. 3、Protein: Western blot; Immuno-histochemistry. ;四、资料分析： 1、传统流行病学指标。 2、遗传学多态性、杂合度等。 3、连锁与分离分析。 4、易感性与危险度分析。;五、质量控制 1、仪器设备的计量校正、正确使用。 2、实验试剂的批次不变。 3、标本采集和储存能确保其生物性状。 4、实验方法统一，操作规范。 5、设立多重对照：标准、空白、+、-。 6、重复试验。;六、研究实例 1、应用PCR和测序追踪HIV传染源。 某地1名牙医（HIV+）与7名HIV感染者(该牙医治疗过的病人)有无传播关系？ 同时抽查35名与该牙医无关的HIV感染，取外周血分离单核细胞，经PCR、测序；结果：牙医HIV株与5名其治疗过的病人的HIV同株,其它毒株与牙医株关系较远。 ;2、GSTm1基因多态与潮汕地区食管癌易感性的关系。 107例食管癌，111例正常人，外周血提取DNA，进行PCR扩增。无产物为“-”。 GSTm1 case control - 68 55 + 39 56 合计 107 111 X2= 4.34, P=0.0371, OR=1.78 (1.01,3.07) ;;;;返回主菜单