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　　树舌多糖抑制胃癌MGC 作者：李荣辉，王玉，郑丽红，张春晶，许惠玉，张英博，潘洪明 【摘要】 目的研究树舌多糖(Ganoderma applanatum polysaccharides,GAPS)粗提物对人胃粘液性腺癌MGC-803细胞增殖、细胞周期及其对受体蛋白酪氨酸激酶EGFR表达的影响，探讨树舌多糖抗肿瘤作用机制。方法MTT法检测不同时间不同浓度树舌多糖对胃癌细胞MGC-803增殖抑制作用;流式细胞仪检测2.0 g/L树舌多糖作用72 h后MGC-803细胞的周期分布，流式细胞仪检测和免疫荧光显微镜观察树舌多糖对MGC-803细胞EGFR表达的影响。结果树舌多糖对胃癌细胞MGC-803具有增殖抑制作用，并呈时间及浓度依赖性。2.0 g/L树舌多糖作用72 h后，MGC-803细胞被阻滞于G0/G1期，S期和G2/M期细胞减少，与细胞对照组比较有差异，具有统计学意义(Plt;0.05)。荧光显微镜下观察树舌多糖组MGC-803细胞EGFR荧光强度较对照组明显减弱;流式细胞仪检测树舌多糖能下调MGC-803细胞EGFR表达，与细胞对照组比较有差异，具有统计学意义(Plt;0.05)。结论树舌多糖可以抑制胃癌MGC-803细胞的增殖，这与树舌多糖能够阻止肿瘤细胞由G1期进入S期、延缓细胞周期进程，降低受体型酪氨酸蛋白激酶EGFR的表达、阻断细胞增殖信号转导途径的信息传递有关。 【关键词】 树舌多糖; MGC-803细胞; 增殖; 细胞周期 　　Abstract：ObjectiveTo study the effects of crude polysaccharide extracted from Ganoderma applanatum (GAPS) on proliferation, cell cycle and EGFR expression of human gastric cancer cell line MGC-803 and its possible mechanisms. MethodsMTT assay etry (FCM). The fluorescence intensity of EGFR expression in MGC-803 cells icroscope. ResultsGAPS inhibited the proliferation of MGC-803 cells in dose-dependent and time-dependent manners. After MGC-803 cells a MGC-803 cells and prevent cell cycle from stepping doation transmission of cell proliferation signal transduction patha applanatum又称“老牛肝”“扁芝”或“扁木灵芝”，是一种大型担子菌，灵芝科植物树舌灵芝的干燥子实体。我国大部分地区均有分布，生长在阔叶树树干上或根部，其性平，味微苦，具有清热、止痛、化积、止血、化痰、抗癌等功效。国内学者对树舌多糖抗肿瘤作用的实验研究，从增加宿主免疫功能到对肿瘤细胞的直接作用、对癌基因,抑癌基因的调控以及对蛋白质组表达的影响等研究[1～7]。本实验通过树舌多糖作用于体外培养胃癌细胞MGC-803，观察其对胃癌细胞增殖和EGFR表达的影响及探讨机制。 　 　1 材料与仪器 　　1.1 细胞株胃癌MGC-803细胞购于 中国 科学 院上海生命科学研究院,细胞以1×105/ml接种于培养瓶中，加入含有10%灭活的胎牛血清、100 IU/ml青霉素、100 μg/ml链霉素的RPMI-1640完全培养液，置于37℃恒温，5%CO2及饱和湿度的培养箱中培养，细胞贴壁生长，每2～3 d传代1次。当细胞长到80%时传代，用0.25%胰蛋白酶消化，弃去胰酶，加入新鲜培养基吹打均匀，按1∶3传代。 　　1.2 药物树舌多糖(含量30%)购于哈尔滨乐泰药业有限公司岔林河中药提取厂。按照 　　 3 结果 　　3.1 树舌多糖对MGC-803细胞增殖抑制作用MTT检测结果显示树舌多糖抑制MGC-803细胞的增殖，并呈时间和剂量依赖性，即随着药物浓度的增加和作用时间的延长，细胞增殖抑制作用明显加强。2.0 g/L树舌多糖作用72 h后对MGC-803抑制率为45.2%。结果见图1。 　　图1 树舌多糖对MGC-803细胞增殖抑制曲线 　　3.2 树舌多糖对细胞周期分布的影响MGC-803细胞在2.0 g/L树舌多糖作用72 h后，收集细胞上流式细胞仪并检测分析细胞周期分布，经ModFit LT for macv3.0软件分析结果：树舌