左氧氟沙星替硝唑注射液细菌内毒素检查法探讨.docVIP

　　左氧氟沙星替硝唑注射液细菌内毒素检查法探讨 【关键词】 左氧氟沙星；替硝唑；细菌内毒素检查法；凝胶法 　　［摘要］ 目的：建立左氧氟沙星替硝唑注射液细菌内毒素检查法。 方法 ：细菌内毒素检查法-凝胶法。结果：左氧氟沙星替硝唑注射液用碱液调pH值至中性后的二倍稀释液对细菌内毒素检查没有干扰作用。结论：用细菌内毒素检查法控制左氧氟沙星替硝唑注射液的热原是可行的。　　 　　［关键词］ 左氧氟沙星；替硝唑；细菌内毒素检查法；凝胶法 　　左氧氟沙星为氧氟沙星的左旋体，其抗菌活性为氧氟沙星的二倍，不良反应发生率较低，已作为临床抗感染的首选药物之一；替硝唑是继甲硝唑之后新一代硝基咪唑类化合物，抗厌氧菌和抗原虫作用强，毒副作用较小。两药组成复方注射液，在 治疗 临床常见的需氧菌和厌氧菌混合感染方面，既扩大抗菌谱，发挥协同作用以提高疗效，延迟或减少耐药菌株的产生，又方便临床用药，降低护理人员的工作量。复方注射液中的热原检查，我们探讨了细菌内毒素检查法的可行性，结果表明，可采用细菌内毒素检查法-凝胶法检测复方注射液中的热原（细菌内毒素）。 　　1　仪器和试药 　　1.1　仪器　　　　　　　 　　电热恒温水温箱（±1 ℃），上海医用恒温设备厂。 　　1.2　试药 　　1.2.1　细菌内毒素工作标准品，规格：100EU/支，批号：200510, 中国 药品生物制品鉴定所。 　　1.2.2　鲎试剂　　　　　　　 　　标示灵敏度为0.25 EU/ml,批号：0603150，湛江博康海洋生物制品厂；鲎试剂,标示灵敏度为0.125 EU/ml,批号：0407292,湛江博康海洋生物制品厂；鲎试剂,标示灵敏度为0.25 EU/ml,批号：0510211,湛江安度斯生物有限公司；上述鲎试剂规格均为0.1 ml/安瓿。 　　1.2.3　细菌内毒素检查用水　　　　　　　 　　规格：2 ml/支，批号：060220,湛江博康海洋生物制品厂。 　　1.2.4　碱性pH值调节剂　　　　　　　 　　规格：2 ml/支，批号：050908,湛江博康海洋生物制品厂。 　　1.2.5　左氧氟沙星替硝唑注射液　　　　　　　 　　批号2005082220051215，规格：100 ml：左氧氟沙星0.2 g与替硝唑0.4 g，本院研制。 　　2　 方法 与结果 　　2.1　细菌内毒素限值的确定　　　　　　　 　　参照 中国 药典及各国药典大输液品种的细菌内毒素限值一般定为0.5 EU/ml，结合人临床用量，我们确定左氧氟沙星替硝唑注射液的细菌内毒素限值为0.5 EU/ml。 　　2.2　鲎试剂灵敏度的复核　　　　　　　 　　按中国药典方法［1］，对所用鲎试剂灵敏度进行复核，结果符合规定。 　　2.3　样品干扰试验［1］　　　　　　　 　　按公式MVD＝CL/λ 计算 出左氧氟沙星替硝唑注射液最大有效稀释倍数。取左氧氟沙星替硝唑注射液（批用细菌内毒素检查用水稀释成二倍稀释液，按中国药典方法［1］溶解细菌内毒素工作标准品，并稀释成相应的细菌内毒素溶液，与细菌内毒素检查用水配成的相应浓度的细菌内毒素溶液，用同一批号的鲎试剂（λ＝0.25 EU/ml）进行比较，结果表明样品二倍稀释液有干扰作用。取灵敏度0.125 EU/ml的鲎试剂，将样品进行四倍稀释，重复干扰试验，样品四倍稀释液仍然有干扰作用。因为样品溶液偏酸性，有可能由此造成干扰作用，故预先添加细菌内毒素工作标准品溶液至适量的样品溶液中，用碱性pH值调节剂调整pH值至中性，并稀释成含相应浓度细菌内毒素的样品二倍稀释液，再重复干扰试验，结果见表1。表1　干扰试验结果鲎试剂批号（略） 　　从表1可以看出，左氧氟沙星替硝唑注射液（批调整pH值至中性后的二倍稀释液对细菌内毒素检查无干扰作用。取另外二个批号20050906）样品同法试验，结果相同。表明可用细菌内毒素检查法控制左氧氟沙星替硝唑注射液的热原。 　　2.4　样品细菌内毒素检查［1］　　　　　　　 　　根据上述干扰试验结果和确定的细菌内毒素限值，将左氧氟沙星替硝唑注射液调整pH值至中性并稀释二倍后，用灵敏度为0.25 EU/ml的鲎试剂，依法［1］对四批样品进行检测，结果均符合规定。 　　3　小结和讨论 　　左氧氟沙星替硝唑注射液二倍、四倍稀释液进行细菌内毒素检查时均有干扰作用，当用碱性溶液调整pH值至中性时，其二倍稀释液无干扰作用，由此表明采用细菌内毒素检查法控制左氧氟沙星替硝唑注射液的热原是可行的。细菌内毒素检查法控制热原比家免法更简便、快捷。 　　 参考