血液细胞形态学检查标准操作程序.doc

血液细胞形态学检查标准操作程序 目的：指导血液细胞形态学的检查。 该SOP变动程序：本操作程序的改变，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报下述人员批准：专业负责人、科主任。 具体内容 原理：将血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用瑞氏—吉姆萨复合染料染色后，在光学显微镜下油镜观察各类细胞的形态特征及数量变化，对血液系统及某些感染疾病有辅助诊断及疗效观察等意义。 标本要求： 采血后推制厚薄适宜的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾清晰可分。 推好的血膜应在空气中晃动，以促使其快干，以免细胞变形缩小。 试剂准备：瑞氏—吉姆萨复合染液。 仪器、器材要求：显微镜、洁净载玻片。 操作具体步骤： 染色：平置玻片于染色架上，滴加染色液3～5滴，使其迅速盖满血膜约1min后，滴加缓冲液5～10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混合，10～20min后用水冲去染液待干。 选择涂片细胞分布厚薄适宜、染色良好的区域在油镜下观察各类细胞的形态及数量变化。 （六）结果判断 1.红细胞：正常形态呈双凹圆盘状、无核、平均直径7.2μｍ，染粉红色，外周血中无有核红细胞、异常形态红细胞量小于1％。 2.白细胞：正常外周血中白细胞分为中性杆状核粒细胞占1％～5％，中性分叶核粒细胞占50％～70％，嗜酸性粒细胞占0.5％～5％，嗜碱性粒细胞占0～1％，淋巴细胞占20%～40%，单核细胞占3%～8%，无幼稚细胞。 3.血小板：正常形态呈椭圆形及不规则形，无核、胞质中有嗜苯胺蓝颗粒，直径约2～4μｍ，多为2μｍ左右，呈单个或成堆分布。 （七）干扰因素 1.涂片要新鲜，涂片自然晾干后立即进行染色，如特殊情况下，一般不超过一周，否则，细胞蛋白质变性，使染色偏碱。 2.染色时间长短除与气温有关外，也与细胞增生情况、各批染液的性能有关，故要求将染色中的涂片在显微镜下观察，待颗粒清楚、核浆分明，着色满意后才终止染色，冲洗晾干待检。 3.染色过深得涂片可用瑞氏染液滴加于涂片上，马上冲洗；染色过浅可重染，先加缓冲液再加染色液，混合后复染到需要的深度。 （八）临床意义 （一）红细胞分布异常 1.红细胞分布异常：红细胞呈缗钱状分布，见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、高纤维蛋白原血症等，红细胞聚集成堆见于冷凝集素血症。 2.红细胞大小及染色异常 a.低色素性小红细胞增多：见于缺铁性贫血、海洋性贫血、骨髓增生异常综合症等。 b.正色素性或高色素性大红细胞增多，见于巨幼细胞性贫血、抗核酸代谢药物等影响。 3.异性红细胞 a.球形红细胞增多：见于遗传性球形红细胞增多症（常大于25%）、自身免疫性溶血性贫血等。 b.椭圆形红细胞增多：见于遗传性椭圆形红细胞增多症（常大于25%）、巨幼细胞性贫血等。 c.口形红细胞增多：见于遗传性口形红细胞增多症、弥漫性血管内凝血、酒精中毒等。 d.靶形红细胞增多：见于海洋性贫血、某些血红蛋白病、脾切除术后等。 e.镰形红细胞增多：主见于镰状红细胞型贫血。 f.红细胞形态不整：如三角形、泪滴形、盔形、新月形、尾形、星形、棘形等，畸形红细胞增多主见于弥漫性血管内凝血及严重巨幼细胞性贫血等。 4.红细胞内异常结构出现 a.嗜碱性点彩红细胞增多：见于重金属中毒及较严重的增生性贫血。 b.染色质小体（Howell_Jolly小体）：常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、脾切除术后等。 c.卡波环（Cabot环）：常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血等。 5.有核红细胞增多:正常人外周血一般无有核红细胞，在溶血性贫血、白血病、骨髓转移癌、骨髓外造血症等外周血中可见数量不等的幼红细胞增多。 （二）白细胞形态异常 1、中性粒细胞形态异常 （1）大小不均：见于一些病程较长的化脓性质症 （2）中毒颗粒：见于较严重的化脓菌感染及大面积烧伤等。 （3）空泡变性：常见于严重感染，特别是败血症时易见。 （4）Dohle小体：见于严重感染。 （5）核变性：包括核固缩、溶解、破碎等，见于严重感染。 （6）核左移：即外周血中杆状核粒细胞增多，严重者出现晚幼粒、中幼粒甚至早幼粒细胞增多，常见于急性化脓性感染、急性中毒、急性溶血反应等。 （7）核右移：正常人外周血中性粒细胞以分三叶为主，若分五叶者大于3%称为核右移，主要见于巨幼细胞贫血及抗核酸代谢药物治疗时。