JETstart2.0中抽说明书.pdfVIP

描述 培养物体积和DNA产量 JETSTAR是一种独特的新型阴离子交换树脂，由GENOMED所 JETSTAR试剂盒是专为从大肠杆菌培养物中提取并纯化高拷贝 开发。这种新树脂是以一次性柱 （Mini、Midi和Maxi柱）提供 质粒DNA而设计的。低拷贝质粒也能制备，不过必须使用更大的 的，在重力流条件下使用，不需要额外的仪器。JETSTAR 培养物体积。 Plasmid Kits 的设计结合了JETSTAR柱和改良的碱/SDS裂解步 GENOMED 推荐用LB 培养基来培养大肠杆菌细胞以便采用 骤，适合质粒DNA 的制备。GENOMED产品是能在45-60分钟 JETSTAR柱来制备质粒DNA 。此外JETSTAR系统也兼容其它的 内获得超纯的质粒DNA的理想工具。 培养基，特别是那些为提高质粒产量而设计的。细胞密度应当约 为1×109个细胞/ml 培养基（1-1.5 A600单位/ml）。 操作步骤：操作步骤中采用了改良的碱/SDS方法来制备澄清的 裂解液。在中和之后，裂解液上样到JETSTAR柱（Mini、Midi或 Maxi ），质粒DNA与阴离子交换树脂结合。清洗树脂，去除RNA 高拷贝质粒 （3-5 µg DNA/ml LB培养基） 和其它所有的杂质。纯化的质粒DNA最终从柱上洗脱，并通过乙 醇沉淀浓缩。 A. Culture Volume DNA Yield 质粒产量：利用JETSTAR柱，质粒DNA的产量预计能达到最多 Mini 1 - 5 ml 3 - 20 µg 20 µg （Mini）、100 µg （Midi）和500 µg （Maxi ）。所有类型、 Midi 15 - 25 ml 45 – 100 µg 所有大小的质粒DNA均可制备，但产量在很大程度上取决于质粒 Maxi 100 ml 300 – 500 µg 拷贝数 （低/ 中/高），质粒类型，细菌菌株及所使用的细菌培养物 体积。质粒DNA的平均回收率达到85%-90% 。 低拷贝质粒 （0.2-1 µg DNA/ml LB培养基） 质粒纯度：JETSTAR纯化的质粒DNA 比两次氯化铯超速离心所 纯化质粒DNA 的质量更高。相应地，它的推荐应用范围也非常 A. Culture Volume DNA Yield 广，包括转染、显微注射、疫苗接种、基因治疗、荧光和放射性 测序、扩增、体外转录、克隆等。 Mini 10 - 15 ml 2 - 15 µg