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- 2017-05-11 发布于广东
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补阳还五汤药浴对大鼠周围神经损伤再生影响的实验研究.doc
补阳还五汤药浴对大鼠周围神经损伤再生影响的实验研究
【摘要】 目的研究补阳还五汤药浴对周围神经损伤后修复的作用。方法采用雌性ethods90 ly divided into 3 groups, group A edicated bath ,group B inistration, group C simply had an end-to-end sutured operation serve as control. The model of ischiadic nerve transsection in the Buyang Huaninutes a time every other day. The intragastric administration l a time every other day. Group C simply had an end-to-end sutured operation. Electrophysiology and histomorphology edicated bath could obviously reduce the death number of motor neurons and sensory neurons after nerve injury, prevent the atrophy and degeneration of gastroemius muscle and promote the functional recovery after injury. ConclusionThe Buyang Huanedicated bath may play an active role in the nerve repair of neuron, damage region and ending effective apparatus from multiple facts.
Key in,加水量约5 000 ml,煮沸后文火再煎约20 min,煎得剂量约3 000~3 500 ml, 自然 冷却至微温,进行灌胃或药浴。中药材及煎制均由黑龙江中医药大学附属第一 医院 煎药室提供。
1.2 方法
按手术先后顺序随机分成A、B、C 3组,A组为补阳还五汤药浴组,B组为补阳还五汤口服组。C组为单纯端端缝合组,每组30只。造模采用大鼠坐骨神经横断损伤模型:右坐骨神经于坐骨结节下0.5 cm水平横行切断,用9/0无创尼龙缝合线均匀缝合神经外膜3针。造模成功后7 d起,A组大鼠放入补阳还五汤温热药液中游泳,隔日1次,5 min/次;B组用补阳还五汤制剂灌胃,隔日1次,3 ml/次;C组大鼠进行单纯端端缝合。3组均于术后6周取材进行电生理学、组织形态学观察。
1.2.1 坐骨神经功能指数(SFI)测定
自制大鼠行走箱。术后3周起,隔日进行SFI测定。碳素墨水刷染大鼠双后足,放在底面铺设白纸的行走箱通道上行走,可清晰记录大鼠行走过程中双侧后足足印7~8个,选取质量较好的正常侧足和实验侧足测定各变量,将数值代入Bain公式[3] 计算 SFI。
1.2.2 神经传导速度(NCV)测定
术后6周各组随机取15只大鼠,1%戊巴比妥钠腹腔麻醉,切取术侧坐骨神经全长,采用Pclab生物信号采集处理系统(黑龙江中医药大学生理教研室提供)记录诱发电位并计算出坐骨神经传导速度(NCV)。
1.2.3 组织形态学观察L4,L5段脊髓及背根神经节术后6周各组取15只大鼠,麻醉后经左心室向升主动脉插管后,灌入洗涤液(生理盐水200 ml,肝素钠4 mg, 盐酸普鲁卡因1.0 g)后, 4%多聚甲醛300 ml心脏灌注固定,取脊髓L4~L5段和双侧L4,L5脊神经节置于4%多聚甲醛液中固定2 d后,进行常规石蜡包埋,连续切片,片厚6 μm。石蜡切片脱蜡,切片入1%焦油紫染液,37℃温箱中浸染1 h后,蒸馏水速洗,95%乙醇迅速分化,镜检尼氏体呈紫色,其他组织几乎无色,无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。应用美国Image-pro plus专业图像分析系统进行观察,每张切片随机抽取5个同倍率视野,进行图像分析。
神经损伤局部:实验侧坐骨神经测定NCV后,距吻合口近远端各0.5cm处横行切断坐骨神经,常规HE染色,并应用美国Image-pro plus专业图像分析系统进行观察及分析。
失神经支配腓肠肌:各组大鼠麻醉状态下取大鼠双侧腓肠肌,称湿重后取中份肌组织作常规HE染色,切片同样应用图像分析系统进行观察及分析。
1.2.4 主要观察指标SFI,NCV及组织形态学观察。
1.2.5 统计学分析数据采用±s表示,数据统计分析均在SPSS11
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