色谱柱培训讲课.pptVIP

色谱柱培训 前言 色谱柱是HPLC分离过程中的核心。一支稳定、高效的色谱柱对建立普适性强、重现性好的方法是必不可少的。不同供应商的色谱柱，甚至来源相同，认为完全一样的色谱柱之间，可能存在很大的差异，尤其是不同色谱柱在塔板数、色谱峰的对称性、保留值、峰间距及使用寿命会有所不同，而这些不同对建立理想的HPLC方法会产生很大的影响 培训内容 介绍色谱柱担体、固定相以及柱填料信息 讨论色谱柱使用过程中的问题及适宜的解决方案 同时讨论在常规HPLC分析中，为获得最佳结果，一支“好”色谱柱的重要意义 色谱柱的结构 色谱柱与柱填料的特性 柱填料：大多数使用HPLC分离的色谱柱使用硅胶微粒作为担体。少数为多孔聚合物担体或者其他材料的担体 硅胶担体与键合的有机表层应用范围广，重点讨论 常见的几种柱填料微粒：实心微球、全多孔微球、灌注微粒 实心微球型特点：实心核、起作用的是表面很薄的外壳、微粒的大小通常为1.5~2.5um，快速传质的动力学，对大分子有突出的分离效能；表面积较小，样品容量有限，仅适用于分析型HPLC；峰型尖锐，要求HPLC仪器的柱外峰展因素极小，避免峰展宽 灌注色谱柱填料：包含孔径达4000~8000?的贯穿孔，贯穿孔中有较小的内联孔（如300~1000?）；高流速时，对流与扩散作用共同作用，进入并离开孔结构，减小了峰展宽，柱效与小微粒相当，但压力降却小许多。 使用范围：大分子如蛋白