共焦拉曼与萤光显微镜光学系统对光步骤.pdfVIP

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共焦拉曼與螢光顯微鏡光學系統的對光步驟 (for 使用者) 偵測區 樣品區 對光步驟: 1. 開啟綠光雷射並熱機 15 分鐘 2. 開啟 AOM (輸入+24 VDC 的驅動電壓及+0.8 VDC 的調變電壓給 RF driver ) 3. 調整反射鏡 M1 及 M2 的傾斜角旋鈕,使雷射光通過光圈 I1 及 I2 。 4. 調整反射鏡 M3 及 M4 的傾斜角旋鈕,使雷射光通過光圈 I3 及 I4 。 樣品的放置步驟: Sample holder 放置樣品 Sample holder 固定在樣品座上 1. 卸下 100X 物鏡 2. 將樣品固定在蓋玻片上 3. 利用 3M 膠帶將蓋玻片固定在 sample holder 上(樣品要置於在 sample holder 中間的空洞中) 4. 將 sample holder 固定在樣品座上(上面的螺絲先稍微旋入,然後再將下面的 螺絲完全鎖緊,最後再將上面螺絲完全鎖緊) 5. 移動樣品的上下左右,使光點打在所要量測的位置 6. 調整樣品座的傾斜角旋鈕,使樣品表面的反射光通過 I3 7. 安裝 100X 物鏡(鏡頭需滴油) 8. 將樣品移近物鏡,使過 beam splitter 之後的光束直徑為 2.5 mm (焦點位置的 粗調) 9. 微調 pinhole 1 的上下左右,使過 pinhole 1 的光亮度最大 10. 微調透鏡 L4 的左右使反射光通過 slit (需掀開光譜儀的蓋子觀察) 儀器控制程式說明 (進行資料擷取時,要先設定資料的儲存路徑) : 物鏡移動平台之控制器 光柵之旋轉台的控制器 使用電控光柵之旋轉台之前,要先按旋轉台之 controller 上“rem/loc”按鍵,確保 亮起紅燈才可由電腦控制。 A. 手動控制光柵之旋轉台 上圖的“Moving Distance”表示為旋轉台上的移動量,設定完移動量後即可按 “Move”開始移動。 B. 光柵自動掃描 上圖為擷取光譜的自動擷取程式,當輸入波長的位移量及掃描範圍後,即可按 “Scan”開始掃描。掃描過程中若要終止程式的話,則按“STOP Scan”。 C. 手動控制物鏡 上圖的操作方法是,先選擇軸向,再來按“Motor On”,接著即可 依照自己的 需求移動物鏡。 “Step”為物鏡的一步位移量。輸入移動量後,則按“Go”開始移動。(0.1 um≦ 移動量≦23 mm,此 23 mm 是假設 actuator 的指標位於零點) “指定物鏡的位置”意指要求物鏡移動所輸入的位置上。 注意:當物鏡要進行反向移動時,會有 9 um 空轉量,也就是 controller 上的讀值 需扣除 9 um 才是物鏡真正的移動量。 D. 物鏡二維掃描

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