2007癌基因.pptVIP

研究生讲义 　　 病 毒 癌 基 因 致 癌 机 制 癌基因 oncogene 概念：是细胞内控制细胞生长的基因，具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性。癌基因异常表达时，其产物可使细胞无限制分裂 癌基因包括病毒癌基因(v-onc)和细胞癌基因(cellular oncogene，c-onc) 病毒癌基因 virus oncogene 最初是在Rous肉瘤病毒（为一种逆转录病毒）中发现的。该序列在病毒基因组中不编码病毒的结构成分，对病毒的复制也无作用。 受到外界刺激如辐射，化学致癌剂的影响时，就会产生转化作用 病毒核酸片段即病毒携带的转化基因称为癌基因 细胞癌基因和原癌基因 与病毒癌基因具有同源性而存在于正常细胞中的核酸片段称为细胞癌基因（cell oncogene）。原癌基因的产物具有促进正常细胞生长、增殖、分化和发育的功能。 将正常细胞内未被激活的癌基因称为原癌基因（proto-oncogene） 病毒癌基因 与细胞癌基因的比较 病毒癌基因在两端通常有序列的丢失. 病毒癌基因无内含子，细胞癌基因通常有内含子或插入序列.c-src:60KD,C-ras:21KD 病毒癌基因常会出现碱基取代或碱基缺失. 二者的同源序列有一定程度的差异,致转化性质的迥异.H-ras:3/189;k-ras:7/189. 癌基因及其产物的检测方法　　检测癌基因及其产物的标本可以是实体瘤和体液，前者需要提取DNA或RNA进行检 测，或经过组织切片以免疫组化方法检测基因表达产物，或者采用血尿标本，用 ELISA等法检测癌基因蛋白，几种主要检测方法介绍如下. (一)Southern杂交法 (二)原位杂交 (三)酶联免疫吸附试验 (四)免疫组化染色（五)PCR技术 (六)PCR相关技术 （二）多基因的协同规律： 核内癌基因易与胞浆癌基因发生协同作用（前者使细胞永生，后者改变细胞形态，降低对生长因子和贴壁的要求）。如myc与ras协同致癌 癌基因的激活与抑癌基因的失活协同致癌 一、概念 抑癌基因（tumor suppressor gene）又称为抗癌基因（antioncogene）是一类在正常情况下对细胞增殖有负调控作用，而在两个等位基因都缺失或失活时可促进肿瘤形成的基因。 细胞杂交试验 正常细胞 肿瘤细胞 非肿瘤型杂交细胞 杂交融合 肿瘤细胞1 肿瘤细胞2 杂交融合 非肿瘤型杂交细胞 正常细胞 失去某些基因 肿瘤细胞 生长因子（膜）受体结构的特点 膜外区 生长因子特异结合部位 跨膜区 胞内区 具有TPK活性 生长因子（膜）受体作用机理 生长因子与膜受体胞外结构域特异结合 受体二聚化 受体胞内结构域显现TPK活性 特定蛋白的酪氨酸残基磷酸化 生物效应 NH2 NH2 COOH COOH 细胞外配体 结合结构域 跨膜结构域 细胞内 TPK结构域 erbB原癌基因产物 erbB癌基因产物 erbB原癌基因与癌基因蛋白产物比较 细胞膜 v-erbB蛋白由于缺少了配基结 合域，无需与EGF结合就可形成二 聚体，表现为EGF受体酪氨酸蛋白 激酶的持续活性，刺激细胞的增值。 （三）表达产物为非受体酪氨酸蛋白激酶类的癌基因 癌基因 染色体位置 表达产物 c-src 20q12-13 TPK c-yes 18q21.3 TPK c-fgr 1q34-36 TPK c-abl 9q34 TPK src蛋白家族的特点 1、借N-端结合在质膜内表面 2、分子中的特殊结构： （1）N-端的SH（src homology region）3结构、SH2结构 （2）酪氨酸蛋白激酶活性区 该区域有两个酪氨酸残基起调节其激酶活性，416位的酪氨酸残基磷酸化可增强其激酶活性和细胞转化能力，527位酪氨酸残基磷酸化则可抑制其激酶活性。 （3）C-结尾区 src蛋白的作用机理 生长因子 与受体结合 受体 二聚化 受体显现TPK活 性并自身磷酸化 二聚化受体的磷酸酪氨酸残基与src蛋白SH2结构结合，同时使src蛋白416位酪氨酸残基磷酸化，激活其激酶活性 src蛋白通过SH3结构与胞内 蛋白结合，并使他们磷酸化 ①磷酸化PLCr的Tyr残基，激活PLCr ②激活ras-GAP,调节ras