冠心病伴严重心律失常患者循环miR-21表达升高.pdfVIP

18 中国循环杂志 2014 年 8 月 第 29 卷 增刊 ·心血管病基础医学· 热休克蛋白 90 对 PDGF 诱导的 律失常组。利用实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）检测研 大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响 究对象循环血浆中miR-21的相对表达量，比较循环mi-21在  王国坤 ，李松华 ，徐志云1 2 1 各组的相对表达情况。本研究所指的严重心律失常包括室性 上海市，第二军医大学附属长海医院（200433） 心动过速、心室扑动或颤动、心房扑动或颤动、Ⅱ度或以上 1 胸心外科 2 心血管内科 房室传导阻滞、窦性停搏或窦房传导阻滞；血流动力学障碍 包括阿-斯综合征、晕厥、低血压、急性心衰。 目的：确定热休克蛋白90（HSP90）对PDGF诱导的大 结 果：CAD组循环miR-21水平显著高于对照组 鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响，并探索其可能作用机制。 （1.24±0.32 vs 0.91±0.43，P=0.012）；CAD伴严重心律失 方法：采用胶原酶消化法原代培养大鼠胸主动脉平滑肌 常组miR-21相对表达量（1.32±0.58）明显高于CAD无严重 细胞，免疫荧光检测确定细胞纯度；根据HSP90序列分析， 心律失常组（1.15±0.41）和对照组（P=0.024，P0.001）， 设计siRNA；应用脂质体细胞转染siRNA的方法抑制HSP90 CAD无严重心律失常组miR-21相对表达量也高于对照组 的表达，定量PCR和Western blot的方法检测siRNA的抑制效 （ P=0.025）；以CAD组循环miR-21相对表达量均数（1.15） 率；利用PDGF-bb诱导刺激平滑肌细胞增殖；CCK8法检测 为界值，定义界值以上为基因高表达组，否则为低表达组， 细胞增殖能力的变化；流式细胞术检测细胞生长周期的改变； 发现miR-21高表达组在住院期间发生严重心律失常的比例较 定量PCR和western blot检测细胞周期蛋白表达水平的变化。 低表达组升高（OR=2.3，95% CI: 1.9~5.3，P0.05）。 结果：原代培养的平滑肌细胞纯度在90%以上，满足实 结论：冠心病心律失常患者miR-21表达升高，miR-21 验所需。细胞中转染HSP90的siRNA后，HSP 90的mRNA和 与冠心病心律失常密切相关，可能在心律失常的发生中发挥 蛋白水平明显降低，分别为对照组的65.3%和57.6%（P0.05）； 作用。 PDGF-bb刺激明显促进平滑肌细胞生长，而降低HSP90水平   显著影响PDGF-bb诱导的细胞增殖（P0.05）；流式细胞术 心肌细胞离子通道与室性心律失常的研究进展 检测发现降低HSP90水平引起平滑肌细胞生长停滞在细胞周  郭欢，易敏，王竞涛，李海霞，王忠 期的G1期，定量PCR和western blot检测发现细胞周期蛋白 北京市，中国中医科学研究院 北京中医药大学 广安门医院 （100000） A和细胞周期蛋白D的表达在siRNA干预后明显降低。   结论：HSP90通过调控平滑肌细胞的生长周期参与调节 目的：总结历年来对心肌细胞离子通道的研究进展，期 细胞增殖过程，可能在动脉粥样硬化发生发展中有重要作用。 望找到更明确的室性心律失常的机制，为更好的治疗提供理 论基础。