007：内质网与高尔基体.ppt

内 质 网 一、内质网的化学组成 由脂类和蛋白质构成。内质网膜含丰富的磷脂酰胆碱，而鞘磷脂含量很少。内质网膜含的蛋白质含量比细胞膜高。 内质网膜具有大量的酶，其中葡萄糖－6－磷酸酶是内质网的标志酶。 二、内质网的结构 内质网是由单位膜围成的一些形状大小不同的小管、小泡及扁囊状结构,相互连接形成一个连续的网状膜系统 三、内质网的类型 1、粗面内质网 (rough endoplasmic reticulum,RER) 2、滑面内质网 （smooth endoplasmic reticulum,SER) 微粒体(microsome) 在细胞匀浆和差速离心过程中获得的由破碎的内质网自我融合形成的近似球形的膜囊泡状结构,在体外实验中,具有蛋白质合成、蛋白质糖基化和脂类合成等内质网的基本功能。 肌质网(sarcoplasmic reticulum) 心肌和骨骼肌细胞中的一种特殊的内质网,其功能是参与肌肉收缩活动。 1、粗面内质网 形态上多为板层状排列的扁囊。 在合成分泌蛋白的细胞中粗面内质网发达,如胰腺外分泌细胞粗面内质网在胞质中密集排列,形成同心层板状结构。 2、滑面内质网 形态上多为彼此连通的分枝小管或小泡。 在一些特化的细胞中滑面内质网比较丰富,如胃壁细胞、皮脂腺细胞、横纹肌细胞及分泌甾类激素的细胞都富含滑面内质网。一般说来,细胞内粗面内质网丰富者,则滑面内质网的量就少,反之亦然。 肝细胞例外,两类内质网都丰富,有时两者相互转化。 四、内质网的功能 内质网是一个非常复杂的网状膜系统,它将细胞质基质分隔成许多不同的小区域,使细胞内一些物质代谢能在特定的环境中进行。同时,它在细胞极为有限的空间内建立起大量的膜表面,这非常有利于许多酶的分布和各种代谢过程高效率地进行。 1、粗面内质网的功能 参与蛋白质合成后的运输 ①向细胞外分泌的蛋白质(或称外输蛋白),包括酶类、肽类激素和抗体及胞外基质蛋白，这类蛋白常以分泌的形式输送到细胞外。 ②一些膜嵌蛋白、如细胞膜蛋白、内质网等膜性细胞器膜上的膜蛋白，还有膜受体和膜抗原等。 ③需要与其它细胞组分严格隔离的蛋白质，如溶酶体蛋白等。 ④一些需要进行复杂修饰的蛋白质。 一些蛋白合成后,需进入内质网腔进行糖基化,形成糖蛋白,然后转运至相应的部位 信号序列的发现和证实 微粒体实验 在George Palade用离心技术分离到有核糖体结合的微粒体,即发现膜结合核糖体(membrane-bounded ribosome)之后, 科学家推测:膜结合核糖体合成的蛋白质首先要进入内质网的腔,然后通过选择性的分泌过程输出到细胞外,而游离核糖体上合成的蛋白质则留在细胞内使用。 为了研究内质网上合成的蛋白质是否进入了内质网的腔, Colvin Redman 和 David Sabatini用分离的RER小泡(微粒体)进行无细胞系统的蛋白质合成, 证明了膜结合核糖体上合成的蛋白质进入了微粒体的腔。 信号序列存在的直接证据 1972年,César Milstein和他的同事用无细胞系统研究免疫球蛋白(IgG)轻链合成时获得了信号序列存在的直接证据, 证明Blobel等的建议是正确的。他们用分离纯化的核糖体在无细胞体系中用编码免疫球蛋白轻链的mRNA指导合成多肽,发现合成的多肽比分泌到细胞外的成熟的免疫球蛋白在N端有一段多出的肽链, 它有20个氨基酸,他们推测,这段肽具有信号作用,使IgG得以通过粗面内质网并继而分泌到细胞外。 2、滑面内质网的功能 （1）脂类的合成 导肽引导蛋白进入的组织及其特点 信号肽signal peptide： 常指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移（定位）的N-末端的氨基酸序列（有时不一定在N端），至少含有一个带正电荷的氨基酸，中部有一高度疏水区以通过细胞膜。 　　信号肽假说认为，编码分泌蛋白的mRNA在翻译是首先合成的是N末端带有疏水氨基酸残基的信号肽，它被内质网膜上的受体识别并与之相结合。信号肽经由膜中蛋白质形成的孔道到达内质网内腔，随机被位于腔表面的信号肽酶水解，由于它的引导，新生的多肽就能够通过内质网膜进入腔内，最终被分泌到胞外。 核定位信号(nuclear localization signal, NLS) 　　定位信号是另一种形式的信号肽, 可位于多肽序列的任何部分。一般含有 4～8个氨基酸, 且没有专一性, 作用是帮助亲核蛋白进入细胞核。入核信号与导肽的区别在于: ①由含水的核孔通道来鉴别; ②入核信号是蛋白质的永久性部分,在引导入核过程中,并不被切除, 可以反复使用, 有利于细胞分裂后核蛋白重