小反刍兽疫荧光PCR诊断.pdfVIP

蟹一熏一丝塑■………………一～团墨丁—————1丽丽菊而 小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒引起的发生 于小反刍动物的一种急性、烈性、高度接触性传染 病，主要在绵羊和山羊中流行，其对幼龄动物的致 死率可达50％～80％。 一步法荧光定量RT—PCR方法已用于对本病 的检测。 1材料与方法 1．1 样品 4份样品s1、S2、S3、S4均为病羊鼻 腔拭子。在装有病羊鼻腔拭子的离心管中加入 1mL PBS液后，离心管在混匀器上振荡混匀2rain， 5000r／min离心2rain，然后取上清液0．2mL备用。 ^7更刍兽覆荧光PCR 凌洪权1，黎朝燕2，黄恒1，李 泰1，陈忠琼1，董春霞1，姚璐 (1．重庆市动物疫病预防控制中心，重庆渝北401120； 2．重庆市璧山区来凤畜牧兽医站，重庆璧山402763) 中图分类号：$854．4文献标识码：C 文章编号：1001—8964(2017)02～0048—01 1．2检测仪器全自动核酸提取纯化仪i荧光 小反刍兽疫是一种传染性极强的病毒性疾 PCR仪，BIO—RAD。 病，是世界动物卫生组织规定必须上报的疾病之 1．3试剂核酸提取试剂盒(磁珠法)，小反刍兽一。 疫通用型实时荧光RT—PCR检测试剂盒。 山羊和绵羊是该病毒的自然宿主，山羊比绵 1．4检测方法参照核酸提取试剂盒说明书 羊更易感，尤其是3～8月龄的山羊，而哺乳期的 进行小反刍兽疫病毒RNA提取。 动物抵抗力较强。 反应条件：42℃5rain，95℃10S，循环95℃ 当前小反刍兽疫主要分布在撒哈拉和赤道 5 oC35 S，60 S，共40次，在循环第二步(60℃35S) 之间的非洲地区，中东(阿拉伯半岛、以色列、叙 收集荧光信号。 利亚和约旦)、南亚次大陆(印度、尼泊尔、孟加拉 2检测结果 国、巴基斯坦和阿富汗)。小反刍兽疫在这些地区 按照小反刍兽疫通用型实时荧光RT—PCR造成了严重的经济损失，成为这些地区影响小反 检测试剂盒使用说明进行结果判定。结果样品 刍兽类家畜生产的重要疾病。 S1、S2、S3和S4均测出小反刍兽疫病毒核酸特异 目前对小反刍兽疫没有有效的治疗手段，接 性荧光曲线，其检测结果呈阳性。 种疫苗是一种有效的控制小反刍兽疫的方法。在 3 小结 免疫接种的同时，应加强对引进羊只的检疫并做 收稿日期：2016—12—23 好隔离、消毒工作，以防病原引入。■ 雹 万方数据