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- 2017-05-22 发布于贵州
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生物化学实验聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳,血清蛋白的分离的实验报告
生物化学实验聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳,血清蛋白的分离的实验报告
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实验报告
分子生物学实验报告
实验名称:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
姓名:同组人:xxx
学号:xxxx
日期:
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
1 引言
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS)是目前分离蛋白质亚基并测定其分子量的常用方法,为检测电泳后凝胶中的蛋白质,一般使用考马斯亮蓝(CBB)染色[1]。本次实验的目的在于学习聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理,并掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质的操作技术。
2 材料和方法
2.1 实验原理
2.1.1 聚丙烯酰胺凝胶的性能及制备原理
2.1.1.1 性能
聚丙烯酰胺凝胶的机械性能好,有弹性,透明,相对地化学稳定,对pH和温度变化比较稳定,在很多溶剂中不溶,是非离子型的,没有吸附和电渗作用。通过改变浓度和交联度,可以控制孔径在广泛的范围内变动,并且制备凝胶的重复性好。由于纯度高和不溶性,因此还适于少量样品的制备,不致污染样品。
2.1.1.2 制备原理
聚丙烯酰胺凝胶是用丙烯酰胺(Acr)和交联剂甲叉双丙烯酰胺(Bis)在催化剂的作用下聚合而成。聚丙烯酰胺凝胶聚合的催化系统有化学聚合和光聚合两种。本实验是用化学聚合。化学聚合的催化剂通常多采用过硫酸铵(AP)或过硫酸钾,此外还需要一种脂肪族叔胺作加速剂,最有效的加速剂是N,N,N’,N’-四甲基乙二胺(T
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