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草食动物 牛冷冻精液质量检验的方法 李乃顺 （黑龙江省孙吴县农产品质量安全检验检测站，黑龙江孙吴 164299 ） 摘 要：牛人工授精技术是现在经常被应用的技术,在这一过程中冷冻技术占有着重要的地位。本文简要介绍了牛精 液冷冻和冷冻精液的检测,以及各种牛精液的检测指标及影响。牛精液对农业、畜牧业、奶产品行业、食品业以及其他 相关行业都有着重要意义。筛选出质量良好的精液，并使精子与卵细胞结合形成受精卵，人工体外受精至成长有着决 定性的意义，因此不能忽视，要以科学严谨的态度来对待。检验方法多种多样，希望后续可以有更好的研究进展。 关键词：牛精液；冷冻；质量检测 DOI:10．3969/J．ISSN．1671-6027．2017．03．053 当今社会中，人工授精技术及冷冻精液在逐渐发展，筛 的测定采用姬姆萨染色法，并计数。测量方法多种多样，并不 选出有优良的牛精液越来越重要。各种因素都可以影响牛精 局限于这几种，上述只是常规方法以及相关指标的规定。 液的品质。特别是牛精液经过冷冻后，活力和状态都会收到 影响。牛精液的质量又会关系到人工授精的成功与否。牛精 计算机辅助精液分析（CASA）系统是利用计算机辅助精 液的数量、活力、密度、畸形等都会影响到关乎到精液的质 子运动图像分析仪来检测精子质量。具有操作便捷、直观、快 量。筛选出质量好的，品质高的精液对后续的受精及培养等 速、重复性好、准确度高等优点。对有条件的实验室或者生产 环节有着重要意义。依靠着现代社会的生物技术，可以检验 厂家可以采用此种方法。也可以采用流式细胞仪，来代替荧 出冷冻精液的质量，根据质量检验的结果，再做下游操作，才 光显微镜染色技术, 流式细胞仪检测精子的质量可以快速呈 能为公司创造更多的收益。 现结果而且结果准确和操作简便等，能全面直观的检测待检 1 牛冷冻精液样品的处理 项目,能够完全体现精子所处的环境及本身的状态，精子的各 项指标都可以以此体现。不得不提的是IVF试验,即让精子 在低温中储存牛精液后，解冻后的精子可以恢复受精的 与卵母细胞在体外条件下结合成受精卵，人工培养至桑椹 能力。但冷冻仍旧会损伤细胞，从而导致一部分精子失活甚 期，再转入代孕母牛，让充当代孕妈妈的代孕母牛生育出小 至是死亡。所以,为了保证精子的质量，采集的精液数量一定 牛。在这个过程中,要检查其第一极体排出率、受精卵发育状 要大于需求的精子量。另一方面，精子存贮在液氮的低温环 况、受精卵的各项组织发育情况等指标,并且根据这些数据进 境下，-196℃的环境会大幅度的抑制精子的活动和新陈代 行分析，用精子的受精能力来判定精子的质量状况。 谢，所以冷冻的环境可以用来保存牛精子。冷冻精子之所以 会在常温下恢复活力，还是取决于冷冻保护剂的加入。 牛精液不应含有过多的异常精子。一般将含7%~10%头 部或中段异常的精子数作为最大值, 高于此值的精液就不能 良好的冷冻保护剂，可以使精子不经过水分的结晶这一 使用。总异常率超过2%的精液就不可使用。解冻后精液,顶 步骤。水分在低温环境下会结成冰晶，而冰晶对细胞是有很 体的完整性与受精力呈高度相关, 因此精子顶体完整率是目 大损伤的。冰晶会改变细胞膜的渗透压，两侧的渗透压不同， 前评定精子受精力的最好指标。在最初的发育过程中,顶体和 细胞会脱水，对精子来说，这是致命的。降温速度越慢，冰晶