CW0744-1HiFi-MMLVcDNA第一链合成试剂盒03012013-.PDF

订购电话：010 4006-222-360 订购邮箱：order@ 订购网址： HiFi-MMLV cDNA Kit HiFi-MMLV cDNA第一链合成试剂盒 CW0744 保存条件：-20℃保存。 组分说明 Cat. No. CW0744 CW0744A Kit Size 25 100 HiFi-MMLV ，200 U/μl 25 μl 100 μl 5×RT Buffer 120 μl 500 μl Primer Mix 60 μl 240 μl dNTP Mix，2.5 mM Each 120 μl 500 μl DTT，0.1 M 60 μl 240 μl RNase-Free Water 1 ml 1 ml 产品简介 　　本产品是专为两步法RT-PCR第一步实验配制的cDNA第一链合成试剂盒。本产品包 含从RNA模板逆转录成cDNA第一链所需的所有试剂，其中包括HiFi-MMLV逆转录酶、 反应缓冲液、引物、dNTP等。经过突变改造的HiFi-MMLV逆转录酶RNase H活性缺失， 减少了逆转录反应中RNA的降解，更容易获得全长的cDNA 。HiFi-MMLV逆转录酶热稳 定性强，可得高产量的cDNA，使用简单方便。本系统对后续的PCR以及定量PCR试 验兼容性高，适用各种PCR反应的DNA聚合酶。 产品特点 ·RNase H-：经突变的HiFi-MMLV逆转录酶，RNase H活性缺失，更易获得全长cDNA 。 ·使用方便：试剂盒包含除RNA模板外的逆转录所需全部试剂。 注意事项 1．在操作过程中应避免RNase污染，防止RNA降解或实验中的交叉污染，建议在专门 的区域进行RNA操作，使用专门的仪器和耗材，操作人员带口罩和一次性手套并经 常更换手套。 2 ．实验尽量使用一次性塑料器皿，若使用玻璃器皿，应使用0.1 ％DEPC （焦碳酸二乙 酯）水溶液在37℃处理12小时，并在120℃下高压灭菌30分钟后使用，或者将玻璃 器皿在180℃下干热灭菌60分钟后使用。实验中用到的无菌水应使用0.1%的DEPC 处理后进行高压灭菌。 3 ．本试剂盒中的所有试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心 后使用。所涉及的酶类使用后应尽快放回-20℃，避免反复冻融。 4 ．若起始RNA的量小于50 ng，建议加入RNA酶抑制剂（RNasin）。本试剂盒并未提 供，如需要可单独向本公司订购，货号：CW0596。 1 使用方法 注意：10 ng-5 μg总RNA可建立20 μl反应体系，如果总RNA量大于5 μg ，请按比例扩大反应体系。 i 逆转录操作步骤： 1．将RNA模板、引物、dNTP Mix、DTT、RT Buffer、HiFi-MMLV和RNase-Free Water 溶解并置于冰上备用。 2 ．根据以下表格配制反应体系，总体积为20 μl 。 试剂 20 μl反应体系 终浓度 dNTP Mix，2.5 mM Each 4 μl 500 μM Each Primer Mix 2 μl RNA Template X μl