中草药红茶菌体外抗甲Ⅰ流感病毒(H1N1)作用研究.pdfVIP

摘要 药红 H1N 细胞 病毒 病毒 关键 动物 于正 气迅 等其 病毒 是针 宿主 同类型的流感病毒发生基因重组而产生跨宿主的新型流 TCID50=4．67。 研 感病毒．如能传染人的猪流感病毒和禽流感病毒…。 1．4细胞：狗肾细胞MDCK，P3，本实验室冻存保种。 虽然流感病毒作为一种呼吸道病毒．传染性非常强． 2 实验方法 究 但是流感病毒却是一种抵抗力较弱的病毒。它对于乙酸、 2．1 中草药红茶菌制剂的制备 乳酸等酸|生化学试剂尤其敏感。因此．根据流感病毒对酸 所用红茶菌菌种购自北京食品研究所。红茶菌母液 的敏感性．研制出各种酸性消毒剂．通过喷雾消毒来预防 的制备参考吕爱军等提供的方法问．制备中药提取液：将 流感。但是这些消毒作用都是瞬时性的。消毒过后，外面 0．2％茶叶、o．5％甘草、O．2％罗汉果和0．2％野菊花放入水 的流感病毒依然可以通过呼吸道和消化道侵染易感动物。 溶液中煮沸．过滤后冷却到约30。(i以下时加入20％红茶 红茶菌是一种包含醋酸菌、酵母菌为主、产酸能力很强的 菌母液．静置发酵2周后用于检测或临床使用【2j。 共生菌群．它能在醋酸菌、酵母菌的共生作用下产生醋酸、 2．1 中草药红茶菌制剂的处理 柠檬酸、葡萄糖酸等酸性物质，红茶菌培养液pH值一般 中草药红茶菌制剂样品以0．22斗m微孔过滤除菌， 保持在2．5—4．5之间【2】。红茶菌对人体胃肠道的保健机理 以0．5mff管分装备用：阳性药物利巴韦林，用DMEM培养 之一就是依靠降低胃肠道的DH值来抑制病原菌的生长【3j 基制备成母液浓度为10mg／ml，以o．22斗nl微孔过滤除 。茶叶、罗汉果、甘草、野菊花是一些具有药食两用的中草 菌．以O．5mU管分装备用。 药植物．这些植物的提取液普遍具有提高动物免疫力、拮 2．2 中草药红茶菌对MDCK细胞毒性的测定 X 抗病原细菌、病毒等方面的作用。因此，如果利用红茶菌 常规消化MDCK细胞后．以1．0105个／ml密度接 发酵上述茶叶等提取液来制备微生态制剂．将这种中草药 种于96孔细胞板上．置于37。C培养。待细胞汇合至紧密 红茶菌喷入这些流感病毒易感动物的呼吸道和消化道．红 单层后，弃上清．加入含不同浓度的培养基(小牛血清含量 茶菌中的复合菌群将通过产生醋酸等有机酸来降低这些 为5％)继续培养4天。每个实验浓度接种4个细胞复孔。 流感病毒感染途径的pH值，同时在茶叶等中草药提取液 4天后终止实验，每孔加入M1Tr100斗l(浓度为0．5％)避 的协同作用下将能有效预防流感的发生。本文报道了这 光孵育4小时后．弃上清。加入等量DMSO充分溶解后， 于x 计算受试样品的TC50。实验过程中设置不加药物的细胞 收稿日期：2016—11-15 对照孔。样品稀释比例：1：2、1：4、1：6、1：8、1：10、1：16、130、152。 基金项目：本课题为国家现代农业产业技术体系项目资 2．3 受试样品在MDCK细胞上对流感病毒FMl抑制作 用的测定 金资助(nycytx一17)P2及中国热带农、【k科学院院 常规消化细胞后．以1．0×105个／ml密度接种于96 所基本科研业务费项目(PZS009)资助。 孔细胞板上．置于37。C培养。待细胞汇合至紧密单层后， 作者简介：蒋小强(1986一)，男，汉族，甘肃张掖人，研究生 弃上清