201610质粒放线菌.pptVIP

* * * * * 重复子 竞争结合调控 * * 4 质粒的转移： 　　少数质粒如F因子、Ｒ因子、大的Col因子等，可通过细菌接合而转移，而大多数质粒不能通过接合转移。这些质粒只能通过细胞分裂或转化在细胞间传递。 转移性质粒 非转移性质粒（包含可被诱动转移的质粒） * 主动转移与诱动转移 一般地， 转移性质粒多数能主动转移。 自身不能转移，但可以在含有转移性质粒存在的情况下，跟随转移性质粒将自身转移到受体细胞中，称这类质粒为诱动转移。bom位点（nic），mob基因(mobilization gene) 诱动转移机制：质粒自身不包含完整的转移操纵子。 * ColE1 的诱动转移： 当相容性的两个质粒如F和ColE1共存于同一菌细胞时，ColE1质粒的mob基因进行转录，其产物使bom位点（nic位点）发生单链断裂而出现缺口，于是ColE1的构型由超螺旋型转变为缺口开环型。F质粒编码性菌毛，为ColE1提供它所缺乏的接合功能。 * 5　质粒的不亲和性 　　　(plasmid incompatibility) ??在没有选择压力的情况下，两种亲缘关系密切的不同质粒，不能在同一宿主细胞中稳定地共存，这一现象称为质粒的不亲和性，也称不相容性。 　　　例如colEI派生质粒，它们之间是互不相容的，也就是说，这些亲缘关系较近的不同质粒，当两种进入同一细胞后，必定有一种在细胞的增殖过程中，被逐渐排斥(稀释)掉。称这些质粒间是不相容的。 * * 不亲和群 Incompatiblity group 彼此不相容的质粒属于同一个不亲和群 。 彼此能够共存的亲和质粒，则属于不同的不亲和群。 大肠杆菌质粒现已鉴别出25个以上的不亲和群。 它们之间是相容的，而同一个不亲和群内的质 粒是不相容的。 广泛宿主质粒 incP * * * 类着丝粒位点 sopC SopB蛋白结合在sopC区，形成分配复合体。 * 6　分子遗传学中的质粒载体 构建新的质粒载体 选择合适的质粒载体 * 克隆载体：克隆单个基因；建基因文库。 表达载体：诱导型 分泌载体： 分泌信号（信号肽） 穿梭载体：两种（以上）宿主 整合型载体： …… …… …… …… * 一 放线菌基因组 线状基因组 质粒线状或环状 （以天蓝色链霉菌为例） 第八章 放线菌遗传重组 * * * * * * * * * * 异质（核）系 heteroclone 异核体 heterocaryon * 放线菌接合与大肠杆菌的区别 1 UF×UF 可育（SCP2） IF×IF， NF×NF ， NF×IF 可育 F+×F+, Hfr×Hfr, Hfr×F+ ，F-×F-不育 2 IF×UF 子代是IF， NF×UF 子代是NF 3 NF×UF 带动染色体双向转移 Hfr×F- 带动染色体单向转移 4 异质（核）系存在（heteroclone），单交换可存活 5 遗传分析时，需增加分析连锁关系。 * * 附加体：某些质粒具有与核染色体整合和脱离的功能，如F因子。 * * * 第七章 微生物染色体外遗传 一 遗传性状由染色体外遗传因子控制 的检验方法 二 染色体外遗传因子的物质基础（DNA） 三 原核生物的质粒 * 一 遗传性状由染色体外遗传因子控制的检验方法 １非孟德尔式遗传的检验 根据杂交子代性状是否分离的检验 通过细胞质交换的检验 通过基因定位的检验 2 根据专一性诱变和消除的检验 * * * * * * 质粒消除（Curing）: 采用化学试剂或改变生长条件而使细菌中的质粒丢失. 质粒的消除与消除剂浓度、作用时间有关 嵌合染料适用于消除大肠杆菌中的质粒. 十二烷基硫酸钠对具有性纤毛的细菌作用效果较好. 适当提高培养温度可消除一些细菌中的质粒 胸腺嘧啶限量法适用于其营养缺陷型菌株的质粒消除. 利用原生质体的形成与再生及反复冻融菌体均可消除细菌中的质粒. * 质粒的丢失与消除： 由于质粒不是细菌生活所必须的遗传成分。所以质粒容易丢失。在细菌培养时，要保持质粒必须加上适当的选择压力。 质粒的消除是指人为地消除质粒。 * 引起质粒消除的化学试剂 吖啶黄，吖啶橙，原黄素，溴化乙啶等； 5-氟尿嘧啶，丝裂霉素Ｃ，环己亚胺 紫外线，亚硝基胍，亚硝基甲基脲 2,3,5-三苯基四氮唑 40 ℃以上的高温处理 链霉素（莱哈衣藻），利福平 Co2+, Ni2+ * 盐酸吖啶黄 吖啶橙 原黄素 溴化乙锭 * 二 染色体外遗传的物质基础DNA 电泳 电镜 密度梯度离心 质粒DNA测序，序列分析 * * 三 原核生物质粒 质粒的一般性质 质粒的功能 质粒的复制 质粒的转移