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PCR_SSCP灵敏度的影响因素_梅平
270 2000 19 4
-
PCR SSCP
1 2 1
梅 平 刘双信 吕灿群
P CR-SSCP , PCR-SSCP , : P CR
P CR-SSCP
; , ; , ;
R446. 1
, 37 2 , , TE , 4
, » DNA : 10Ll DN A TE ,
, : 2ml, OD 260
-( - ) 280, ( = 260/
PCR SSCP OD DNA DNA OD OD
( RFLP) 280)
, PCR-SSCP 1. 2. 2PCR-SSCP ¹ PCR :
[ 1]
, 9 : P 15 TT GCA GGT GGTT GA
- ,
PCR SSCP 3 , 2 5
AAAT CT C P AT CT TA CT CCCAT CACT G
( GR) 9 A3 PCR : 10Buff r 5Ll, dNT P 4Ll, Taq
PCR SSCP , 1 2
1Ll, DNA 4Ll, P P 2. 5Ll,
PCR-SSCP , 50 : 9: 94 45 1 ,
Ll PCR xon
60 45 1 30 , 72 45 1 30 28
1 35 , 95 5 , 72 5
1. 1DNA ( : 5 1 ,
PCR PCR Ll Ll
) ; (
SDS K Sigma 1. 5%( ) ,
EB
) PCR ( dNT P, Prom ga ) ; T aq º PCR ( PCR-SSCP) [ 2] : ( a)
( Biostar ) ; ( 2
: 30% 10. 64ml, H O
) : ( ) ; DNA 19. 06 , 5 8 , 10% 280 ,
ml TBE ml
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